中国预防兽医学报
中國預防獸醫學報
중국예방수의학보
CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
2009年
4期
247-251
,共5页
房红莹%王蕾%鲁俊鹏%黄毓茂%贺东生%罗满林
房紅瑩%王蕾%魯俊鵬%黃毓茂%賀東生%囉滿林
방홍형%왕뢰%로준붕%황육무%하동생%라만림
牛分枝杆菌%MPB83基因%重组腺病毒载体
牛分枝桿菌%MPB83基因%重組腺病毒載體
우분지간균%MPB83기인%중조선병독재체
以牛分枝杆茵Vallee III株基因组DNA为模板,应用PCR扩增获得MPB83基因,克隆后.亚克隆至腺病毒穿梭栽体pShuttle-CMV中,构建的重组穿梭质粒pShuttle-CMV-MPB83经Pme I酶切,转化含腺病毒骨架质粒pAdeasy-I的BJ5183-AD-1感受态细胞,经同源重组获得复制缺陷型重组腺病毒载体pAd-CMV-MPB83.Pac I酶切线性化该质粒,转染AD-293细胞进行病毒包装,转染细胞10 d后出现细胞病变(CPE).PCR、RT-PCR、western blot检测到重组病毒含MPB83基因并成功表达.
以牛分枝桿茵Vallee III株基因組DNA為模闆,應用PCR擴增穫得MPB83基因,剋隆後.亞剋隆至腺病毒穿梭栽體pShuttle-CMV中,構建的重組穿梭質粒pShuttle-CMV-MPB83經Pme I酶切,轉化含腺病毒骨架質粒pAdeasy-I的BJ5183-AD-1感受態細胞,經同源重組穫得複製缺陷型重組腺病毒載體pAd-CMV-MPB83.Pac I酶切線性化該質粒,轉染AD-293細胞進行病毒包裝,轉染細胞10 d後齣現細胞病變(CPE).PCR、RT-PCR、western blot檢測到重組病毒含MPB83基因併成功錶達.
이우분지간인Vallee III주기인조DNA위모판,응용PCR확증획득MPB83기인,극륭후.아극륭지선병독천사재체pShuttle-CMV중,구건적중조천사질립pShuttle-CMV-MPB83경Pme I매절,전화함선병독골가질립pAdeasy-I적BJ5183-AD-1감수태세포,경동원중조획득복제결함형중조선병독재체pAd-CMV-MPB83.Pac I매절선성화해질립,전염AD-293세포진행병독포장,전염세포10 d후출현세포병변(CPE).PCR、RT-PCR、western blot검측도중조병독함MPB83기인병성공표체.
