药学学报
藥學學報
약학학보
ACTA PHARMACEUTICA SINICA
2008年
12期
1233-1238
,共6页
李夷平%姚静%周建平%王伟
李夷平%姚靜%週建平%王偉
리이평%요정%주건평%왕위
尿刊酸偶联壳聚糖%表征%凝胶电泳阻滞%UAC/pDNA%转染效率
尿刊痠偶聯殼聚糖%錶徵%凝膠電泳阻滯%UAC/pDNA%轉染效率
뇨간산우련각취당%표정%응효전영조체%UAC/pDNA%전염효솔
本文将活化的尿刊酸(urocanic acid,UA)与壳聚糖(chitosan,CTS)上的氨基反应合成一种新型非病毒基因载体--尿刊酸偶联壳聚糖(urocanic acid-coupled chitosan,UAC),通过红外(FT-IR)、核磁共振(1H NMR)和元素分析对UAC结构进行确证.用正交实验对取代度的影响因素进行考察,结果表明,随着UA投料量的增加和活化时间的延长,UAC的取代度也随之增大;通过琼脂凝胶电泳阻滞实验分析UAC/质粒DNA(plasmid DNA,pDNA)的复合能力及对DNase I酶抗降解能力,结果证明UAC与pDNA有较好的复合能力和抵制DNase I酶降解能力;通过测定UAC/pDNA复合物粒径和对zeta电位的分析,结果证明复合物具有良好的稳定性和易于进入细胞的性质;体外细胞转染是通过荧光显微镜观察UAC介导pDNA在体外培养HepG2细胞中的表达,结果显示,UAC能介导pDNA转染HepG2细胞并在细胞中表达绿色荧光蛋白,其转染效果较CTS明显增强.因而UAC是一种制备工艺简单,具有应用前景的非病毒基因载体.
本文將活化的尿刊痠(urocanic acid,UA)與殼聚糖(chitosan,CTS)上的氨基反應閤成一種新型非病毒基因載體--尿刊痠偶聯殼聚糖(urocanic acid-coupled chitosan,UAC),通過紅外(FT-IR)、覈磁共振(1H NMR)和元素分析對UAC結構進行確證.用正交實驗對取代度的影響因素進行攷察,結果錶明,隨著UA投料量的增加和活化時間的延長,UAC的取代度也隨之增大;通過瓊脂凝膠電泳阻滯實驗分析UAC/質粒DNA(plasmid DNA,pDNA)的複閤能力及對DNase I酶抗降解能力,結果證明UAC與pDNA有較好的複閤能力和牴製DNase I酶降解能力;通過測定UAC/pDNA複閤物粒徑和對zeta電位的分析,結果證明複閤物具有良好的穩定性和易于進入細胞的性質;體外細胞轉染是通過熒光顯微鏡觀察UAC介導pDNA在體外培養HepG2細胞中的錶達,結果顯示,UAC能介導pDNA轉染HepG2細胞併在細胞中錶達綠色熒光蛋白,其轉染效果較CTS明顯增彊.因而UAC是一種製備工藝簡單,具有應用前景的非病毒基因載體.
본문장활화적뇨간산(urocanic acid,UA)여각취당(chitosan,CTS)상적안기반응합성일충신형비병독기인재체--뇨간산우련각취당(urocanic acid-coupled chitosan,UAC),통과홍외(FT-IR)、핵자공진(1H NMR)화원소분석대UAC결구진행학증.용정교실험대취대도적영향인소진행고찰,결과표명,수착UA투료량적증가화활화시간적연장,UAC적취대도야수지증대;통과경지응효전영조체실험분석UAC/질립DNA(plasmid DNA,pDNA)적복합능력급대DNase I매항강해능력,결과증명UAC여pDNA유교호적복합능력화저제DNase I매강해능력;통과측정UAC/pDNA복합물립경화대zeta전위적분석,결과증명복합물구유량호적은정성화역우진입세포적성질;체외세포전염시통과형광현미경관찰UAC개도pDNA재체외배양HepG2세포중적표체,결과현시,UAC능개도pDNA전염HepG2세포병재세포중표체록색형광단백,기전염효과교CTS명현증강.인이UAC시일충제비공예간단,구유응용전경적비병독기인재체.