河南科学
河南科學
하남과학
HENAN SCIENCE
2008年
12期
1492-1498
,共7页
王文博%谢来峰%王望%王磊%徐存拴
王文博%謝來峰%王望%王磊%徐存拴
왕문박%사래봉%왕망%왕뢰%서존전
大鼠%细胞分离和鉴定%肝细胞%基因表达%标记蛋白
大鼠%細胞分離和鑒定%肝細胞%基因錶達%標記蛋白
대서%세포분리화감정%간세포%기인표체%표기단백
按Higgins等方法制作大鼠2/3肝切除(parital hepatectomy,PH)模型,用两步灌流法分散肝脏细胞,用60%Percoll密度梯度离心分离肝细胞,用免疫组织化学方法定性、定位再生肝(regenerating liver,RL)、分散的肝脏细胞及分离的肝细胞中白蛋白(albumin,ALB)和葡萄糖-6-磷酸酶(glucose-6-phosphatase,G-6-P),用蛋白免疫印迹方法定量肝细胞的ALB和G-6-P,用RT-PCR定量肝细胞的ALB和G-6-P mRNA.初步证实纯化的细胞中,ALB和G-6-P阳性细胞占96%以上;PH后各时间点纯化的肝细胞的ALB和G-6-P mRNA量稳定,相应的蛋白量亦稳定.表明改进后的分离肝细胞方法具有收率高、纯度高、活性好等特点.
按Higgins等方法製作大鼠2/3肝切除(parital hepatectomy,PH)模型,用兩步灌流法分散肝髒細胞,用60%Percoll密度梯度離心分離肝細胞,用免疫組織化學方法定性、定位再生肝(regenerating liver,RL)、分散的肝髒細胞及分離的肝細胞中白蛋白(albumin,ALB)和葡萄糖-6-燐痠酶(glucose-6-phosphatase,G-6-P),用蛋白免疫印跡方法定量肝細胞的ALB和G-6-P,用RT-PCR定量肝細胞的ALB和G-6-P mRNA.初步證實純化的細胞中,ALB和G-6-P暘性細胞佔96%以上;PH後各時間點純化的肝細胞的ALB和G-6-P mRNA量穩定,相應的蛋白量亦穩定.錶明改進後的分離肝細胞方法具有收率高、純度高、活性好等特點.
안Higgins등방법제작대서2/3간절제(parital hepatectomy,PH)모형,용량보관류법분산간장세포,용60%Percoll밀도제도리심분리간세포,용면역조직화학방법정성、정위재생간(regenerating liver,RL)、분산적간장세포급분리적간세포중백단백(albumin,ALB)화포도당-6-린산매(glucose-6-phosphatase,G-6-P),용단백면역인적방법정량간세포적ALB화G-6-P,용RT-PCR정량간세포적ALB화G-6-P mRNA.초보증실순화적세포중,ALB화G-6-P양성세포점96%이상;PH후각시간점순화적간세포적ALB화G-6-P mRNA량은정,상응적단백량역은정.표명개진후적분리간세포방법구유수솔고、순도고、활성호등특점.
