中南大学学报（医学版）
中南大學學報（醫學版）
중남대학학보（의학판）
JOURNAL OF CENTRAL SOUTH UNIVERSITY (MEDICAL SCIENCES)
2008年
11期
1012-1018
,共7页
祝和成%吴尚辉%黄柏英%祝斌%顾焕华%罗学滨%熊壮
祝和成%吳尚輝%黃柏英%祝斌%顧煥華%囉學濱%熊壯
축화성%오상휘%황백영%축빈%고환화%라학빈%웅장
树突状细胞%黑色素瘤%细胞融合%CTL%抗原递呈
樹突狀細胞%黑色素瘤%細胞融閤%CTL%抗原遞呈
수돌상세포%흑색소류%세포융합%CTL%항원체정
目的:探讨HLA-A2的黑色素瘤细胞与HLA-A2+的树突状细胞(DC)融合后体外诱导Me-lan-A特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)的作用及交叉抗原递呈的能力.方法:用PEG法将黑色素瘤细胞与DC融合,在含GM-CSF的RPMl1640完全培养基条件下继续培养24～48 h,然后将融合细胞与Me-lan-A特异性T细胞共同培养.用细胞内细胞素染色法检测其诱导CTL的活性,流式细胞术分析T细胞的活化率.结果:从异体外周血分离的单核细胞在GM-CSF及IL-4条件下培养6 d后,未成熟的DC能表达一定的CD80,CD83,CD86,HLA-DR和HLA-ABC等共刺激分子,而经TNF-α,PGE-2及CD40L诱导成熟的DC,则这些分子的表达进一步上调.融合细胞体外活化Melan-A特异性T细胞的效率为16.72%±4.26%.阴性对照为0.21%±1.84%,阳性对照为28.60%±5.67%.融合细胞活化的CTL能有效地溶解HLA-A2的黑色素瘤细胞.结论:HLA-A2的黑色素瘤细胞与HLA-A2+阳性的DC融合肿瘤疫苗,能在体外有效地交叉递呈MHC-I限制性肿瘤抗原,并诱导Melan-A特异性的CTL和有效地杀伤黑色素肿瘤细胞.
目的:探討HLA-A2的黑色素瘤細胞與HLA-A2+的樹突狀細胞(DC)融閤後體外誘導Me-lan-A特異性細胞毒性T淋巴細胞(CTL)的作用及交扠抗原遞呈的能力.方法:用PEG法將黑色素瘤細胞與DC融閤,在含GM-CSF的RPMl1640完全培養基條件下繼續培養24～48 h,然後將融閤細胞與Me-lan-A特異性T細胞共同培養.用細胞內細胞素染色法檢測其誘導CTL的活性,流式細胞術分析T細胞的活化率.結果:從異體外週血分離的單覈細胞在GM-CSF及IL-4條件下培養6 d後,未成熟的DC能錶達一定的CD80,CD83,CD86,HLA-DR和HLA-ABC等共刺激分子,而經TNF-α,PGE-2及CD40L誘導成熟的DC,則這些分子的錶達進一步上調.融閤細胞體外活化Melan-A特異性T細胞的效率為16.72%±4.26%.陰性對照為0.21%±1.84%,暘性對照為28.60%±5.67%.融閤細胞活化的CTL能有效地溶解HLA-A2的黑色素瘤細胞.結論:HLA-A2的黑色素瘤細胞與HLA-A2+暘性的DC融閤腫瘤疫苗,能在體外有效地交扠遞呈MHC-I限製性腫瘤抗原,併誘導Melan-A特異性的CTL和有效地殺傷黑色素腫瘤細胞.
목적:탐토HLA-A2적흑색소류세포여HLA-A2+적수돌상세포(DC)융합후체외유도Me-lan-A특이성세포독성T림파세포(CTL)적작용급교차항원체정적능력.방법:용PEG법장흑색소류세포여DC융합,재함GM-CSF적RPMl1640완전배양기조건하계속배양24～48 h,연후장융합세포여Me-lan-A특이성T세포공동배양.용세포내세포소염색법검측기유도CTL적활성,류식세포술분석T세포적활화솔.결과:종이체외주혈분리적단핵세포재GM-CSF급IL-4조건하배양6 d후,미성숙적DC능표체일정적CD80,CD83,CD86,HLA-DR화HLA-ABC등공자격분자,이경TNF-α,PGE-2급CD40L유도성숙적DC,칙저사분자적표체진일보상조.융합세포체외활화Melan-A특이성T세포적효솔위16.72%±4.26%.음성대조위0.21%±1.84%,양성대조위28.60%±5.67%.융합세포활화적CTL능유효지용해HLA-A2적흑색소류세포.결론:HLA-A2적흑색소류세포여HLA-A2+양성적DC융합종류역묘,능재체외유효지교차체정MHC-I한제성종류항원,병유도Melan-A특이성적CTL화유효지살상흑색소종류세포.
