中华老年心脑血管病杂志
中華老年心腦血管病雜誌
중화노년심뇌혈관병잡지
CHINESE JOURNAL OF GERIATRIC CARDIOVASCULAR AND CEREBROVASCULAR DISEASES
2008年
1期
50-52
,共3页
朱光明%张微微%陈冰璞%李娟
硃光明%張微微%陳冰璞%李娟
주광명%장미미%진빙박%리연
肌细胞,平滑肌%RNA 干扰%转染%信号传导%质粒
肌細胞,平滑肌%RNA 榦擾%轉染%信號傳導%質粒
기세포,평활기%RNA 간우%전염%신호전도%질립
目的 利用RNA干扰(RNAi)技术使细丝蛋白(FLN)mRNA表达降低,抑制FLN在血管平滑肌细胞(VSMC)中的生成.方法 采用RNAi技术建立FLN表达下调VSMC模型,设计3条可诱发FLN mRNA表达基因沉默的小分子RNA(SiRNA)片段,根据构建质粒载体并转染VSMC的不同,建立7-1、7-2、7-3组和正常对照组、空白载体组5组转染细胞模型,荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白标记物的表达并鉴定转染效率,荧光定量PCR鉴定FLN mRNA抑制效果.Western blot检测FLN蛋白的表达.结果 设计的3条SiRNA均可有效抑制FLN mRNA的表达.其中7-1和7-2组抑制效果最明显,可达60%以上.3组FLN/肌动蛋白(actin)的比值与正常对照组或空白载体组相比较均明显下降.结论 利用RNAi抑制FLN在VSMC中的生成,有可能减少病理状态下收缩表型VSMC向合成表型转化.有可能达到从基因水平上预防或治疗动脉粥样硬化的作用.
目的 利用RNA榦擾(RNAi)技術使細絲蛋白(FLN)mRNA錶達降低,抑製FLN在血管平滑肌細胞(VSMC)中的生成.方法 採用RNAi技術建立FLN錶達下調VSMC模型,設計3條可誘髮FLN mRNA錶達基因沉默的小分子RNA(SiRNA)片段,根據構建質粒載體併轉染VSMC的不同,建立7-1、7-2、7-3組和正常對照組、空白載體組5組轉染細胞模型,熒光顯微鏡下觀察綠色熒光蛋白標記物的錶達併鑒定轉染效率,熒光定量PCR鑒定FLN mRNA抑製效果.Western blot檢測FLN蛋白的錶達.結果 設計的3條SiRNA均可有效抑製FLN mRNA的錶達.其中7-1和7-2組抑製效果最明顯,可達60%以上.3組FLN/肌動蛋白(actin)的比值與正常對照組或空白載體組相比較均明顯下降.結論 利用RNAi抑製FLN在VSMC中的生成,有可能減少病理狀態下收縮錶型VSMC嚮閤成錶型轉化.有可能達到從基因水平上預防或治療動脈粥樣硬化的作用.
목적 이용RNA간우(RNAi)기술사세사단백(FLN)mRNA표체강저,억제FLN재혈관평활기세포(VSMC)중적생성.방법 채용RNAi기술건립FLN표체하조VSMC모형,설계3조가유발FLN mRNA표체기인침묵적소분자RNA(SiRNA)편단,근거구건질립재체병전염VSMC적불동,건립7-1、7-2、7-3조화정상대조조、공백재체조5조전염세포모형,형광현미경하관찰록색형광단백표기물적표체병감정전염효솔,형광정량PCR감정FLN mRNA억제효과.Western blot검측FLN단백적표체.결과 설계적3조SiRNA균가유효억제FLN mRNA적표체.기중7-1화7-2조억제효과최명현,가체60%이상.3조FLN/기동단백(actin)적비치여정상대조조혹공백재체조상비교균명현하강.결론 이용RNAi억제FLN재VSMC중적생성,유가능감소병리상태하수축표형VSMC향합성표형전화.유가능체도종기인수평상예방혹치료동맥죽양경화적작용.
