中国病理生理杂志
中國病理生理雜誌
중국병리생리잡지
CHINESE JOURNAL OF PATHOPHYSIOLOGY
2008年
2期
242-245
,共4页
范钰%张尤历%李华%许则丰%郑树
範鈺%張尤歷%李華%許則豐%鄭樹
범옥%장우력%리화%허칙봉%정수
结肠肿瘤%基因%Cripto%RNA干扰%siRNA%血管内皮生长因子
結腸腫瘤%基因%Cripto%RNA榦擾%siRNA%血管內皮生長因子
결장종류%기인%Cripto%RNA간우%siRNA%혈관내피생장인자
目的:研究Cripto基因对结肠癌细胞血管内皮生长因子的影响.方法:设计合成针对Cripto基因的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA),转染结肠癌LS-174T细胞.细胞分4组:空载对照组(对照组)和不同浓度(3.125、6.25和12.5 nmol/L)的siRNA组.分别于转染24、48、72 h后收集细胞,以实时定量PCR检测结肠癌细胞Cripto mRNA,分别采用Northern blotting和免疫荧光标记法检测癌细胞VEGF mRNA和蛋白表达.分别收集转染72 h的12.5 nmol/L组和对照组细胞,接种于裸鼠背部.30 d后处死裸鼠,收集裸鼠肿瘤组织,对组织VEGF进行免疫组化染色,计算染色平均强度.结果:实时定量PCR检测显示,转染组Cripto mRNA被有效地抑制,且呈浓度和时间依赖性.转染组细胞VEGF蛋白和mRNA明显低于对照组.裸鼠肿瘤免疫组化分析显示,转染组VEGF平均染色强度明显低于对照组.结论:Cripto基因参与了结肠癌组织血管生成的调控.采用siRNA下调Cripto基因表达,可抑制结肠癌组织血管生成.
目的:研究Cripto基因對結腸癌細胞血管內皮生長因子的影響.方法:設計閤成針對Cripto基因的小榦擾RNA(small interfering RNA,siRNA),轉染結腸癌LS-174T細胞.細胞分4組:空載對照組(對照組)和不同濃度(3.125、6.25和12.5 nmol/L)的siRNA組.分彆于轉染24、48、72 h後收集細胞,以實時定量PCR檢測結腸癌細胞Cripto mRNA,分彆採用Northern blotting和免疫熒光標記法檢測癌細胞VEGF mRNA和蛋白錶達.分彆收集轉染72 h的12.5 nmol/L組和對照組細胞,接種于裸鼠揹部.30 d後處死裸鼠,收集裸鼠腫瘤組織,對組織VEGF進行免疫組化染色,計算染色平均彊度.結果:實時定量PCR檢測顯示,轉染組Cripto mRNA被有效地抑製,且呈濃度和時間依賴性.轉染組細胞VEGF蛋白和mRNA明顯低于對照組.裸鼠腫瘤免疫組化分析顯示,轉染組VEGF平均染色彊度明顯低于對照組.結論:Cripto基因參與瞭結腸癌組織血管生成的調控.採用siRNA下調Cripto基因錶達,可抑製結腸癌組織血管生成.
목적:연구Cripto기인대결장암세포혈관내피생장인자적영향.방법:설계합성침대Cripto기인적소간우RNA(small interfering RNA,siRNA),전염결장암LS-174T세포.세포분4조:공재대조조(대조조)화불동농도(3.125、6.25화12.5 nmol/L)적siRNA조.분별우전염24、48、72 h후수집세포,이실시정량PCR검측결장암세포Cripto mRNA,분별채용Northern blotting화면역형광표기법검측암세포VEGF mRNA화단백표체.분별수집전염72 h적12.5 nmol/L조화대조조세포,접충우라서배부.30 d후처사라서,수집라서종류조직,대조직VEGF진행면역조화염색,계산염색평균강도.결과:실시정량PCR검측현시,전염조Cripto mRNA피유효지억제,차정농도화시간의뢰성.전염조세포VEGF단백화mRNA명현저우대조조.라서종류면역조화분석현시,전염조VEGF평균염색강도명현저우대조조.결론:Cripto기인삼여료결장암조직혈관생성적조공.채용siRNA하조Cripto기인표체,가억제결장암조직혈관생성.
