CAJ | 학술논문

目的:运用RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术阻断胰腺癌细胞株PANC-1中NF-κB P65基因表达,并研究该基因沉默后对细胞增殖与凋亡的影响.方法:利用阳离子脂质体LipofectamineTM2000将化学合成的人NF-κB P65的小干扰RNA转染入胰腺癌细胞株PANC-1中.RT-PCR法测定胰腺癌细胞内NF-κB P65mRNA与细胞周期素D1(cyclinD1)mRNA的表达.ELISA法检测NF-κB亚单位P65的DNA结合活性的改变.MTT法测定细胞生长曲线观察细胞增殖的抑制情况.流式细胞仪测定细胞凋亡率及细胞周期的变化.结果:化学合成的人NF-κB P65 siRNA能有效地抑制PANC-1细胞中NF-κB P65与cyclinD1基因在mRNA水平上的表达(P＜0.01),同时ELISA结果显示,RelA siRNA组的p65亚单位与DNA结合活性明显低于阴性对照组和空白对照组(P＜0.05).RelA siRNA组中细胞增殖减慢,凋亡率较对照组明显增加(P＜0.01),同时G1期细胞所占的比例较对照组增加了10%,S期和G2/M期细胞则分别减少了4%与6%.结论:体外实验初步证明NF-κB P65基因在胰腺癌细胞株增殖分化与凋亡方面扮演重要角色,通过沉默其表达可抑制胰腺癌细胞株PANC-1增殖并诱导其凋亡.
목적:운용RNA간우(RNA interference,RNAi)기술조단이선암세포주PANC-1중NF-κB P65기인표체,병연구해기인침묵후대세포증식여조망적영향.방법:이용양리자지질체LipofectamineTM2000장화학합성적인NF-κB P65적소간우RNA전염입이선암세포주PANC-1중.RT-PCR법측정이선암세포내NF-κB P65mRNA여세포주기소D1(cyclinD1)mRNA적표체.ELISA법검측NF-κB아단위P65적DNA결합활성적개변.MTT법측정세포생장곡선관찰세포증식적억제정황.류식세포의측정세포조망솔급세포주기적변화.결과:화학합성적인NF-κB P65 siRNA능유효지억제PANC-1세포중NF-κB P65여cyclinD1기인재mRNA수평상적표체(P＜0.01),동시ELISA결과현시,RelA siRNA조적p65아단위여DNA결합활성명현저우음성대조조화공백대조조(P＜0.05).RelA siRNA조중세포증식감만,조망솔교대조조명현증가(P＜0.01),동시G1기세포소점적비례교대조조증가료10%,S기화G2/M기세포칙분별감소료4%여6%.결론:체외실험초보증명NF-κB P65기인재이선암세포주증식분화여조망방면분연중요각색,통과침묵기표체가억제이선암세포주PANC-1증식병유도기조망.