中华医院感染学杂志
中華醫院感染學雜誌
중화의원감염학잡지
Chinese Journal of Nosocomiology
2008年
1期
25-28
,共4页
苍白密螺旋体%多表位%重组蛋白
蒼白密螺鏇體%多錶位%重組蛋白
창백밀라선체%다표위%중조단백
目的 为梅毒检测试剂提供特异性强、灵敏度高的新型多表位重组抗原.方法 PCR扩增Tp17和Tp0453基因的优势抗原表位,连接后插入pQE32质粒中构建多表位嵌合重组体pQE32/Tp0453-17,IPTG诱导表达,免疫印迹法检测表达产物的免疫反应性.结果 成功构建了多表位嵌合重组质粒pQE32/Tp0453-17,经酶切、测序分析表明,插入的基因片段为Tp0453和Tp17基因,片段长约1180 bp,其测序结果与GenBank上登录序列完全一致;SDS-PAGE分析表达产物发现,融合基因表达的重组蛋白Mr约为52×103,表达产物占全菌总蛋白的19.3%,并且在细胞内主要以包涵体形式存在;用Western印迹法检测显示,该重组蛋白能与梅毒患者的阳性血清反应,具有良好的抗原性.结论 成功表达了具有良好免疫反应性的多表位嵌合重组抗原,为新型梅毒快速诊断试剂盒的研究奠定了良好的实验基础.
目的 為梅毒檢測試劑提供特異性彊、靈敏度高的新型多錶位重組抗原.方法 PCR擴增Tp17和Tp0453基因的優勢抗原錶位,連接後插入pQE32質粒中構建多錶位嵌閤重組體pQE32/Tp0453-17,IPTG誘導錶達,免疫印跡法檢測錶達產物的免疫反應性.結果 成功構建瞭多錶位嵌閤重組質粒pQE32/Tp0453-17,經酶切、測序分析錶明,插入的基因片段為Tp0453和Tp17基因,片段長約1180 bp,其測序結果與GenBank上登錄序列完全一緻;SDS-PAGE分析錶達產物髮現,融閤基因錶達的重組蛋白Mr約為52×103,錶達產物佔全菌總蛋白的19.3%,併且在細胞內主要以包涵體形式存在;用Western印跡法檢測顯示,該重組蛋白能與梅毒患者的暘性血清反應,具有良好的抗原性.結論 成功錶達瞭具有良好免疫反應性的多錶位嵌閤重組抗原,為新型梅毒快速診斷試劑盒的研究奠定瞭良好的實驗基礎.
목적 위매독검측시제제공특이성강、령민도고적신형다표위중조항원.방법 PCR확증Tp17화Tp0453기인적우세항원표위,련접후삽입pQE32질립중구건다표위감합중조체pQE32/Tp0453-17,IPTG유도표체,면역인적법검측표체산물적면역반응성.결과 성공구건료다표위감합중조질립pQE32/Tp0453-17,경매절、측서분석표명,삽입적기인편단위Tp0453화Tp17기인,편단장약1180 bp,기측서결과여GenBank상등록서렬완전일치;SDS-PAGE분석표체산물발현,융합기인표체적중조단백Mr약위52×103,표체산물점전균총단백적19.3%,병차재세포내주요이포함체형식존재;용Western인적법검측현시,해중조단백능여매독환자적양성혈청반응,구유량호적항원성.결론 성공표체료구유량호면역반응성적다표위감합중조항원,위신형매독쾌속진단시제합적연구전정료량호적실험기출.
