广州中医药大学学报
廣州中醫藥大學學報
엄주중의약대학학보
JOURNAL OF GUANGZHOU UNIVERSITY OF TRADITIONAL CHINESE MEDICINE
2008年
1期
68-73
,共6页
黄瑛%尹录录%冯丽玲%杨瑞仪%杨雪芹%曾庆平
黃瑛%尹錄錄%馮麗玲%楊瑞儀%楊雪芹%曾慶平
황영%윤록록%풍려령%양서의%양설근%증경평
青蒿/化学%紫穗槐二烯合酶/分析%基因表达
青蒿/化學%紫穗槐二烯閤酶/分析%基因錶達
청호/화학%자수괴이희합매/분석%기인표체
[目的]重建青蒿素合成代谢途径,以研制青蒿素高产微生物反应器.[方法]以低温预处理青蒿试管苗提取总RNA,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)扩增紫穗槐二烯合酶基因(ADS),并导入大肠杆菌中表达.[结果]青蒿ADScDNA测序结果已在GenBank注册.当ADS cDNA与谷胱甘肽硫转移酶基因(GST)融合并在大肠杆菌表达后,其菌体裂解上清中可检测到谷胱甘肽硫转移酶(GST)活性,表明ADS基因已有可溶性表达.当裂解上清与法呢基焦磷酸(FDP)保温后,成功地检测到青蒿特有的倍半萜烯.[结论]青蒿ADS基因已在细菌体内实现功能性表达.
[目的]重建青蒿素閤成代謝途徑,以研製青蒿素高產微生物反應器.[方法]以低溫預處理青蒿試管苗提取總RNA,採用逆轉錄聚閤酶鏈反應(RT-PCR)擴增紫穗槐二烯閤酶基因(ADS),併導入大腸桿菌中錶達.[結果]青蒿ADScDNA測序結果已在GenBank註冊.噹ADS cDNA與穀胱甘肽硫轉移酶基因(GST)融閤併在大腸桿菌錶達後,其菌體裂解上清中可檢測到穀胱甘肽硫轉移酶(GST)活性,錶明ADS基因已有可溶性錶達.噹裂解上清與法呢基焦燐痠(FDP)保溫後,成功地檢測到青蒿特有的倍半萜烯.[結論]青蒿ADS基因已在細菌體內實現功能性錶達.
[목적]중건청호소합성대사도경,이연제청호소고산미생물반응기.[방법]이저온예처리청호시관묘제취총RNA,채용역전록취합매련반응(RT-PCR)확증자수괴이희합매기인(ADS),병도입대장간균중표체.[결과]청호ADScDNA측서결과이재GenBank주책.당ADS cDNA여곡광감태류전이매기인(GST)융합병재대장간균표체후,기균체렬해상청중가검측도곡광감태류전이매(GST)활성,표명ADS기인이유가용성표체.당렬해상청여법니기초린산(FDP)보온후,성공지검측도청호특유적배반첩희.[결론]청호ADS기인이재세균체내실현공능성표체.
