CAJ | 학술논문

探讨蛋白质酪氨酸磷酸酶α(PTPα)在血液肿瘤细胞中的特异性表达,研究过量表达PTPα对人红白血病细胞K562生物学行为的影响及在裸鼠体内致瘤能力的改变.首先应用RT-PCR和Western印迹检测3种不同类型造血系肿瘤细胞(K562、NB4、Jurkat T)中PTPα的表达水平.根据检测结果,选择K562细胞作为研究对象,利用脂质体将PTPα真核表达载体转染K562细胞,通过G418筛选获得阳性克隆,RT-PCR和Western印迹验证过表达情况;经MTT法检测细胞增值能力的改变;用流式细胞仪检测细胞周期分布和细胞分化状态;并将阳性克隆细胞皮下接种裸鼠,观察PTPα基因转染前后细胞系在裸鼠体内的致瘤能力及瘤体的组织化学变化.上述实验结果表明,通过G418压力筛选获得了PTPα高表达多克隆细胞系K562-PTPα;经体外增殖实验分析,实验组K562-PTPα细胞与未转染组细胞K562和转染空载体组细胞K562-splice相比,细胞生长速度增快,G2/M期细胞比例增加(P＜0.05),而细胞分化状态无明显变化;裸鼠体内致瘤实验显示,K562组、K562-splice组和K562-PTPα组平均瘤重分别为(1.1±0.3)g、(1.3±0.2)g和(2.5±0.5)g;病理切片显示,K562-PTPα组瘤体组织分化程度较对照组低、恶性程度高,细胞的致瘤能力增强(P＜0.01).综上所述,过表达PTPα使K562细胞具有更强的体外增殖能力和体内致瘤性,表明PTPα可能在造血系统恶性肿瘤的发生发展中发挥促进作用.
탐토단백질락안산린산매α(PTPα)재혈액종류세포중적특이성표체,연구과량표체PTPα대인홍백혈병세포K562생물학행위적영향급재라서체내치류능력적개변.수선응용RT-PCR화Western인적검측3충불동류형조혈계종류세포(K562、NB4、Jurkat T)중PTPα적표체수평.근거검측결과,선택K562세포작위연구대상,이용지질체장PTPα진핵표체재체전염K562세포,통과G418사선획득양성극륭,RT-PCR화Western인적험증과표체정황;경MTT법검측세포증치능력적개변;용류식세포의검측세포주기분포화세포분화상태;병장양성극륭세포피하접충라서,관찰PTPα기인전염전후세포계재라서체내적치류능력급류체적조직화학변화.상술실험결과표명,통과G418압력사선획득료PTPα고표체다극륭세포계K562-PTPα;경체외증식실험분석,실험조K562-PTPα세포여미전염조세포K562화전염공재체조세포K562-splice상비,세포생장속도증쾌,G2/M기세포비례증가(P＜0.05),이세포분화상태무명현변화;라서체내치류실험현시,K562조、K562-splice조화K562-PTPα조평균류중분별위(1.1±0.3)g、(1.3±0.2)g화(2.5±0.5)g;병리절편현시,K562-PTPα조류체조직분화정도교대조조저、악성정도고,세포적치류능력증강(P＜0.01).종상소술,과표체PTPα사K562세포구유경강적체외증식능력화체내치류성,표명PTPα가능재조혈계통악성종류적발생발전중발휘촉진작용.