哈尔滨医科大学学报
哈爾濱醫科大學學報
합이빈의과대학학보
JOURNAL OF HARBIN MEDICAL UNIVERSITY
2007年
5期
429-433,436
,共6页
吴德全%高峰%金光鑫%胡彦华
吳德全%高峰%金光鑫%鬍彥華
오덕전%고봉%금광흠%호언화
脐血%间充质干细胞%培养基%体外培养
臍血%間充質榦細胞%培養基%體外培養
제혈%간충질간세포%배양기%체외배양
目的 比较30%血清浓度的L-DMEM与Mesencult培养基对人类足月胎儿脐血间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC)体外培养的效果.方法 采集妊娠时间为36～40周的胎儿脐带血,共20份,分离单个核细胞,每份脐血的单个核细胞平均分入2组进行MSC培养,即30%血清浓度的L-DMEM培养基组和Mesencult培养基组.观察2组培养过程、出现情况以及贴壁细胞形态变化.流式细胞仪检测细胞表面标志和两组细胞的细胞周期,诱导MSC向成骨细胞、脂肪细胞分化,细胞化学染色检测诱导后的细胞变化.结果 30%血清浓度的L-DMEM组的MSC出现率(35%)高于Mesencult培养基组(5%)(χ2=4.16,P＜0.05);30%血清浓度梯度组中破骨样细胞贴壁现象明显被抑制;流式细胞仪检测细胞表面抗原:CD29、CD44、CD105、CD166阳性表达,CD13、CD19、CD34、CD45阴性表达;两组的第8代MSC的G0/G1期细胞比例为(87.67±1.21)%、(89.48±1.24)%,无显著差别(n=6,t=1.782,P＞0.05);30%血清浓度梯度组第8代MSC可被诱导为成骨细胞、脂肪细胞,未见自发分化.结论 应用30%胎牛血清浓度L-DMEM培养基体外培养人足月脐血MSC,可使培养成功率提高至35%,明显优于Mesencult培养基.
目的 比較30%血清濃度的L-DMEM與Mesencult培養基對人類足月胎兒臍血間充質榦細胞(mesenchymal stem cells,MSC)體外培養的效果.方法 採集妊娠時間為36～40週的胎兒臍帶血,共20份,分離單箇覈細胞,每份臍血的單箇覈細胞平均分入2組進行MSC培養,即30%血清濃度的L-DMEM培養基組和Mesencult培養基組.觀察2組培養過程、齣現情況以及貼壁細胞形態變化.流式細胞儀檢測細胞錶麵標誌和兩組細胞的細胞週期,誘導MSC嚮成骨細胞、脂肪細胞分化,細胞化學染色檢測誘導後的細胞變化.結果 30%血清濃度的L-DMEM組的MSC齣現率(35%)高于Mesencult培養基組(5%)(χ2=4.16,P＜0.05);30%血清濃度梯度組中破骨樣細胞貼壁現象明顯被抑製;流式細胞儀檢測細胞錶麵抗原:CD29、CD44、CD105、CD166暘性錶達,CD13、CD19、CD34、CD45陰性錶達;兩組的第8代MSC的G0/G1期細胞比例為(87.67±1.21)%、(89.48±1.24)%,無顯著差彆(n=6,t=1.782,P＞0.05);30%血清濃度梯度組第8代MSC可被誘導為成骨細胞、脂肪細胞,未見自髮分化.結論 應用30%胎牛血清濃度L-DMEM培養基體外培養人足月臍血MSC,可使培養成功率提高至35%,明顯優于Mesencult培養基.
목적 비교30%혈청농도적L-DMEM여Mesencult배양기대인류족월태인제혈간충질간세포(mesenchymal stem cells,MSC)체외배양적효과.방법 채집임신시간위36～40주적태인제대혈,공20빈,분리단개핵세포,매빈제혈적단개핵세포평균분입2조진행MSC배양,즉30%혈청농도적L-DMEM배양기조화Mesencult배양기조.관찰2조배양과정、출현정황이급첩벽세포형태변화.류식세포의검측세포표면표지화량조세포적세포주기,유도MSC향성골세포、지방세포분화,세포화학염색검측유도후적세포변화.결과 30%혈청농도적L-DMEM조적MSC출현솔(35%)고우Mesencult배양기조(5%)(χ2=4.16,P＜0.05);30%혈청농도제도조중파골양세포첩벽현상명현피억제;류식세포의검측세포표면항원:CD29、CD44、CD105、CD166양성표체,CD13、CD19、CD34、CD45음성표체;량조적제8대MSC적G0/G1기세포비례위(87.67±1.21)%、(89.48±1.24)%,무현저차별(n=6,t=1.782,P＞0.05);30%혈청농도제도조제8대MSC가피유도위성골세포、지방세포,미견자발분화.결론 응용30%태우혈청농도L-DMEM배양기체외배양인족월제혈MSC,가사배양성공솔제고지35%,명현우우Mesencult배양기.
