第四军医大学学报
第四軍醫大學學報
제사군의대학학보
JOURNAL OF THE FOURTH MILITARY MEDICAL UNIVERSITY
2007年
19期
1738-1741
,共4页
杨章民%郭张燕%许丽艳%高书颖%谢剑君%李恩民
楊章民%郭張燕%許麗豔%高書穎%謝劍君%李恩民
양장민%곽장연%허려염%고서영%사검군%리은민
fascin基因%食管肿瘤%启动子%荧光素酶类%报告基因
fascin基因%食管腫瘤%啟動子%熒光素酶類%報告基因
fascin기인%식관종류%계동자%형광소매류%보고기인
目的:对食管癌细胞中fascin基因启动子区进行克隆鉴定. 方法:应用PCR技术从食管癌细胞系EC109中扩增出fascin基因5′侧翼区5段不同长度的片段,并将其克隆至萤火虫荧光素酶报告基因表达载体pGL3-Basic(pGLB)中, 然后将这些质粒与对照质粒pGLB、内参照质粒pRL-TK共转染EC109细胞,48 h后用双荧光素酶检测系统分析这些重组子报告基因转染细胞的相对荧光强度,并结合生物信息学分析,以判断fascin基因启动子区所在位置. 结果:用DNA重组技术成功构建了5个系列缺失重组荧光素酶报告基因表达载体. 相对荧光素酶活性检测表明,与对照组相比,上述一系列重组质粒转染细胞均显示出较高的荧光素酶活性. 生物信息学分析发现,在启动子区(-436～+1)有标志性调控元件TATA盒(-34～-29). 结论:在食管癌细胞中fascin基因的启动子区可能位于转录起始位点上游约436 bp的区段内.
目的:對食管癌細胞中fascin基因啟動子區進行剋隆鑒定. 方法:應用PCR技術從食管癌細胞繫EC109中擴增齣fascin基因5′側翼區5段不同長度的片段,併將其剋隆至螢火蟲熒光素酶報告基因錶達載體pGL3-Basic(pGLB)中, 然後將這些質粒與對照質粒pGLB、內參照質粒pRL-TK共轉染EC109細胞,48 h後用雙熒光素酶檢測繫統分析這些重組子報告基因轉染細胞的相對熒光彊度,併結閤生物信息學分析,以判斷fascin基因啟動子區所在位置. 結果:用DNA重組技術成功構建瞭5箇繫列缺失重組熒光素酶報告基因錶達載體. 相對熒光素酶活性檢測錶明,與對照組相比,上述一繫列重組質粒轉染細胞均顯示齣較高的熒光素酶活性. 生物信息學分析髮現,在啟動子區(-436～+1)有標誌性調控元件TATA盒(-34～-29). 結論:在食管癌細胞中fascin基因的啟動子區可能位于轉錄起始位點上遊約436 bp的區段內.
목적:대식관암세포중fascin기인계동자구진행극륭감정. 방법:응용PCR기술종식관암세포계EC109중확증출fascin기인5′측익구5단불동장도적편단,병장기극륭지형화충형광소매보고기인표체재체pGL3-Basic(pGLB)중, 연후장저사질립여대조질립pGLB、내삼조질립pRL-TK공전염EC109세포,48 h후용쌍형광소매검측계통분석저사중조자보고기인전염세포적상대형광강도,병결합생물신식학분석,이판단fascin기인계동자구소재위치. 결과:용DNA중조기술성공구건료5개계렬결실중조형광소매보고기인표체재체. 상대형광소매활성검측표명,여대조조상비,상술일계렬중조질립전염세포균현시출교고적형광소매활성. 생물신식학분석발현,재계동자구(-436～+1)유표지성조공원건TATA합(-34～-29). 결론:재식관암세포중fascin기인적계동자구가능위우전록기시위점상유약436 bp적구단내.
