生物化学与生物物理进展
生物化學與生物物理進展
생물화학여생물물리진전
PROGRESS IN BIOCHEMISTRY AND BIOPHYSICS
2007年
8期
844-850
,共7页
王玉琪%孙益嵘%陈艺彩%王海洪
王玉琪%孫益嶸%陳藝綵%王海洪
왕옥기%손익영%진예채%왕해홍
粪肠球菌%FabF同源蛋白%β酮脂酰ACP合成酶
糞腸毬菌%FabF同源蛋白%β酮脂酰ACP閤成酶
분장구균%FabF동원단백%β동지선ACP합성매
FabB和FabF是大肠杆菌(Escherichia.coli)脂肪酸合成的关键酶.生物信息学分析显示,粪肠球菌基因组中有2个与大肠杆菌fabF同源的基因:fabF1和fabF2,缺少与fabB同源的基因.用粪肠球菌(Enterococcus faecalis)V583总DNA为模板,PCR扩增fabF1和fabF2基因,以pBAD24为载体,构建了重组质粒pHW13(fab F1)和pHW14(fabF2).体内体外研究显示:fabF1基因能互补大肠杆菌fabB突变,FabF1具有β酮脂酰ACP合成酶Ⅰ(FabB)活性;fab F2能互补大肠杆菌fabF突变,FabF2具有β酮脂酰ACP合成酶Ⅱ(FabF)活性.同时发现粪肠球菌FabF2不同于大肠杆菌FabF,它还拥有微弱β酮脂酰ACP合成酶Ⅰ(FabB)活性,可使大肠杆菌fabB突变株产生少量的不饱和脂肪酸.上述结果表明,FabF类酶(FabF like enzyme)同样可以具有β酮脂酰ACP合成酶Ⅰ(FabB)活性.
FabB和FabF是大腸桿菌(Escherichia.coli)脂肪痠閤成的關鍵酶.生物信息學分析顯示,糞腸毬菌基因組中有2箇與大腸桿菌fabF同源的基因:fabF1和fabF2,缺少與fabB同源的基因.用糞腸毬菌(Enterococcus faecalis)V583總DNA為模闆,PCR擴增fabF1和fabF2基因,以pBAD24為載體,構建瞭重組質粒pHW13(fab F1)和pHW14(fabF2).體內體外研究顯示:fabF1基因能互補大腸桿菌fabB突變,FabF1具有β酮脂酰ACP閤成酶Ⅰ(FabB)活性;fab F2能互補大腸桿菌fabF突變,FabF2具有β酮脂酰ACP閤成酶Ⅱ(FabF)活性.同時髮現糞腸毬菌FabF2不同于大腸桿菌FabF,它還擁有微弱β酮脂酰ACP閤成酶Ⅰ(FabB)活性,可使大腸桿菌fabB突變株產生少量的不飽和脂肪痠.上述結果錶明,FabF類酶(FabF like enzyme)同樣可以具有β酮脂酰ACP閤成酶Ⅰ(FabB)活性.
FabB화FabF시대장간균(Escherichia.coli)지방산합성적관건매.생물신식학분석현시,분장구균기인조중유2개여대장간균fabF동원적기인:fabF1화fabF2,결소여fabB동원적기인.용분장구균(Enterococcus faecalis)V583총DNA위모판,PCR확증fabF1화fabF2기인,이pBAD24위재체,구건료중조질립pHW13(fab F1)화pHW14(fabF2).체내체외연구현시:fabF1기인능호보대장간균fabB돌변,FabF1구유β동지선ACP합성매Ⅰ(FabB)활성;fab F2능호보대장간균fabF돌변,FabF2구유β동지선ACP합성매Ⅱ(FabF)활성.동시발현분장구균FabF2불동우대장간균FabF,타환옹유미약β동지선ACP합성매Ⅰ(FabB)활성,가사대장간균fabB돌변주산생소량적불포화지방산.상술결과표명,FabF류매(FabF like enzyme)동양가이구유β동지선ACP합성매Ⅰ(FabB)활성.
