CAJ | 학술논문

[目的]家蚕(Bombyx mori L.)品种和纯度的鉴别,普遍依靠幼虫斑纹或茧形等形态鉴别方法,该方法易受环境影响,结果时效性和准确性差.[方法]筛选RAPD随机引物,稳定扩增出亲本品种的DNA特异性片段,转换成SCAR标记. [结果]利用微量DNA抽提法,从家蚕主要品种苏5、苏6及其F1孵化前日卵快速提取单粒卵基因组DNA,筛选出RAPD随机引物S42,稳定扩增出苏5和苏6两个亲本品种的DNA特异性片段R5和R6,克隆和测序确认其大小分别为255bp和343bp.Blastn分析显示,R5的nt7～192与家蚕的一个非长末端逆转录转座子(AB002270.1)的nt183～368片段碱基序列有高达91%的相似性,无缺口序列.R6的nt5～340与家蚕的一个WGS(BAAB01113163.1)的nt675～337有91%的一致性,其中存在13个碱基的缺口序列.将2个亲本的RAPD标记转换成SCAR标记,分别利用合成的S42-255-2(P5-2)和S42-343-2(P6-2)SCAR标记引物,能够准确、快速地鉴别所标记的苏5和苏6及其F1蚕品种.[结论]SCAR分子标记方法能够检测家蚕品种和纯度.
[목적]가잠(Bombyx mori L.)품충화순도적감별,보편의고유충반문혹충형등형태감별방법,해방법역수배경영향,결과시효성화준학성차.[방법]사선RAPD수궤인물,은정확증출친본품충적DNA특이성편단,전환성SCAR표기. [결과]이용미량DNA추제법,종가잠주요품충소5、소6급기F1부화전일란쾌속제취단립란기인조DNA,사선출RAPD수궤인물S42,은정확증출소5화소6량개친본품충적DNA특이성편단R5화R6,극륭화측서학인기대소분별위255bp화343bp.Blastn분석현시,R5적nt7～192여가잠적일개비장말단역전록전좌자(AB002270.1)적nt183～368편단감기서렬유고체91%적상사성,무결구서렬.R6적nt5～340여가잠적일개WGS(BAAB01113163.1)적nt675～337유91%적일치성,기중존재13개감기적결구서렬.장2개친본적RAPD표기전환성SCAR표기,분별이용합성적S42-255-2(P5-2)화S42-343-2(P6-2)SCAR표기인물,능구준학、쾌속지감별소표기적소5화소6급기F1잠품충.[결론]SCAR분자표기방법능구검측가잠품충화순도.