生物工程学报
生物工程學報
생물공정학보
CHINESE JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY
2006年
2期
173-179
,共7页
唱韶红%巩新%杨志愉%王同映%马国昌%马清钧%吴军
唱韶紅%鞏新%楊誌愉%王同映%馬國昌%馬清鈞%吳軍
창소홍%공신%양지유%왕동영%마국창%마청균%오군
干扰素%人血清白蛋白%融合蛋白%半衰期%毕赤酵母
榦擾素%人血清白蛋白%融閤蛋白%半衰期%畢赤酵母
간우소%인혈청백단백%융합단백%반쇠기%필적효모
为了延长IFNα2b在血浆中的半衰期,构建了编码HSA和hIFNαb的融合基因并在毕赤酵母中获得高效表达,工程菌经5L发酵罐培养后获得的含融合蛋白的培养液经超滤浓缩、蓝色葡聚糖凝胶层析、疏水柱层析以及阴离子柱层析,融合蛋白的纯度达到95%以上.该融合蛋白能与干扰素抗体和人血清白蛋白抗体结合,并表现出与重组干扰素α2b相似的抗病毒活性.以猕猴为动物模型,分别从静脉和皮下单剂量给药,给药浓度为90μg/kg时,在336h后血浆中仍可检测到融合蛋白.其静脉注射的血浆半衰期为101h,皮下注射的半衰期为68.2h.皮下注射的生物利用度为67.9%.IFNα2b与HSA融合后,明显的延长了血浆半衰期,显现了其良好的临床应用前景.
為瞭延長IFNα2b在血漿中的半衰期,構建瞭編碼HSA和hIFNαb的融閤基因併在畢赤酵母中穫得高效錶達,工程菌經5L髮酵罐培養後穫得的含融閤蛋白的培養液經超濾濃縮、藍色葡聚糖凝膠層析、疏水柱層析以及陰離子柱層析,融閤蛋白的純度達到95%以上.該融閤蛋白能與榦擾素抗體和人血清白蛋白抗體結閤,併錶現齣與重組榦擾素α2b相似的抗病毒活性.以獼猴為動物模型,分彆從靜脈和皮下單劑量給藥,給藥濃度為90μg/kg時,在336h後血漿中仍可檢測到融閤蛋白.其靜脈註射的血漿半衰期為101h,皮下註射的半衰期為68.2h.皮下註射的生物利用度為67.9%.IFNα2b與HSA融閤後,明顯的延長瞭血漿半衰期,顯現瞭其良好的臨床應用前景.
위료연장IFNα2b재혈장중적반쇠기,구건료편마HSA화hIFNαb적융합기인병재필적효모중획득고효표체,공정균경5L발효관배양후획득적함융합단백적배양액경초려농축、람색포취당응효층석、소수주층석이급음리자주층석,융합단백적순도체도95%이상.해융합단백능여간우소항체화인혈청백단백항체결합,병표현출여중조간우소α2b상사적항병독활성.이미후위동물모형,분별종정맥화피하단제량급약,급약농도위90μg/kg시,재336h후혈장중잉가검측도융합단백.기정맥주사적혈장반쇠기위101h,피하주사적반쇠기위68.2h.피하주사적생물이용도위67.9%.IFNα2b여HSA융합후,명현적연장료혈장반쇠기,현현료기량호적림상응용전경.
