CAJ | 학술논문

利用电化学方法检测DNA损伤和污染物基因毒性具有重要意义.根据分子膜层层自组装的原理,将受化学损伤的小牛胸腺DNA固定于氧化铟锡电极表面,制备出核酸传感器界面.使用DNA嵌入剂二联吡啶二吡啶并[3,2-a;2',3'-c]吩嗪钌[Ru(bpy)2dppz2+]作为电信号指示剂,与核酸膜结合后,进行电化学检测.由于嵌入剂具有很高的DNA结合能力和双链特异性,与DNA的结合数量在损伤前后发生变化.在电化学检测中,采用已研究成功的高倍数信号放大机制,用电子给予体草酸还原Ru(bpy)2dppz3+,使之循环产生电流信号.这样,嵌入剂与DNA结合数目的微量变化得到灵敏检测.在工作中,分别采用石英晶体微天平和电化学方法对DNA的表面固定进行了表征,计算出未损伤DNA的固定量为3.2 ng·mm-2,损伤DNA的固定量为4.2 ng·mm-2.对两种核酸膜进行电化学检测,发现在信号放大剂草酸溶液中,损伤DNA的电流信号显著高于未损伤DNA,前者是后者的2.2倍.通过荧光分析,得到Ru(bpy)2dppz2+与损伤DNA的结合常数(K=1.07×107 M-1)和结合比(0.68).嵌入剂与损伤DNA结合物的荧光强度是未损伤DNA的1.5倍,说明损伤后嵌入剂结合量增加了1.5倍.损伤DNA电化学检测信号增高的主要原因是由于信号指示剂嵌入电极表面核酸数量的增加.利用高结合能力、高选择性的电化学嵌入剂,结合高倍数信号放大机制,可以对核酸损伤进行灵敏检测.
이용전화학방법검측DNA손상화오염물기인독성구유중요의의.근거분자막층층자조장적원리,장수화학손상적소우흉선DNA고정우양화인석전겁표면,제비출핵산전감기계면.사용DNA감입제이련필정이필정병[3,2-a;2',3'-c]분진조[Ru(bpy)2dppz2+]작위전신호지시제,여핵산막결합후,진행전화학검측.유우감입제구유흔고적DNA결합능력화쌍련특이성,여DNA적결합수량재손상전후발생변화.재전화학검측중,채용이연구성공적고배수신호방대궤제,용전자급여체초산환원Ru(bpy)2dppz3+,사지순배산생전류신호.저양,감입제여DNA결합수목적미량변화득도령민검측.재공작중,분별채용석영정체미천평화전화학방법대DNA적표면고정진행료표정,계산출미손상DNA적고정량위3.2 ng·mm-2,손상DNA적고정량위4.2 ng·mm-2.대량충핵산막진행전화학검측,발현재신호방대제초산용액중,손상DNA적전류신호현저고우미손상DNA,전자시후자적2.2배.통과형광분석,득도Ru(bpy)2dppz2+여손상DNA적결합상수(K=1.07×107 M-1)화결합비(0.68).감입제여손상DNA결합물적형광강도시미손상DNA적1.5배,설명손상후감입제결합량증가료1.5배.손상DNA전화학검측신호증고적주요원인시유우신호지시제감입전겁표면핵산수량적증가.이용고결합능력、고선택성적전화학감입제,결합고배수신호방대궤제,가이대핵산손상진행령민검측.