CAJ | 학술논문

本实验研究了大豆异黄酮对SHZ-88大鼠乳腺癌细胞内cAMP/PKA信号途径的影响.实验设3组:空白对照组、50μg/ml大豆黄酮及15 μg/ml染料木素组.采用放射免疫测定法(RIA)检测了胞内cAMP的浓度、腺苷酸环化酶(adenylatecyclase,AC)和磷酸二酯酶(phosphodiesterase,PDE)的活性,用(γ-32P)ATP掺入法测定cAMP依赖性PKA的活性,半定量RT-PCR法分析cAMP反应元件结合蛋白(cAMP response element binding protein,CREB)mRNA表达的变化.结果表明:在处理后5 min,大豆黄酮组和染料木素组细胞的cAMP浓度分别比对照组升高了9.5%和11.0%(P＜0.05);10 min时,分别比对照组升高31.0%和40.3%(P＜0.01).3组细胞的AC活性在处理时间内没有明显变化.但在处理后5 min,大豆黄酮组和染料木素组细胞的PDE活性分别降至对照组的71.8%和71.6%(P＜0.05).处理后20 min,大豆黄酮组和染料木素组细胞PKA活性分别上升到对照组的125.8%和122.3%(P＜0.05);到40 min时仍维持在高水平.大豆黄酮组和染料木素组细胞CREBmRNA的表达量在处理后3 h分别比对照组增加31.6%和51.1%(P＜0.05);6 h后开始下降.这些结果提示,大豆异黄酮能够激活大鼠乳腺癌细胞内cAMP/PKA信号途径;而且是通过抑制磷酸二酯酶的活性,导致胞内cAMP浓度升高而实现的.
본실험연구료대두이황동대SHZ-88대서유선암세포내cAMP/PKA신호도경적영향.실험설3조:공백대조조、50μg/ml대두황동급15 μg/ml염료목소조.채용방사면역측정법(RIA)검측료포내cAMP적농도、선감산배화매(adenylatecyclase,AC)화린산이지매(phosphodiesterase,PDE)적활성,용(γ-32P)ATP참입법측정cAMP의뢰성PKA적활성,반정량RT-PCR법분석cAMP반응원건결합단백(cAMP response element binding protein,CREB)mRNA표체적변화.결과표명:재처리후5 min,대두황동조화염료목소조세포적cAMP농도분별비대조조승고료9.5%화11.0%(P＜0.05);10 min시,분별비대조조승고31.0%화40.3%(P＜0.01).3조세포적AC활성재처리시간내몰유명현변화.단재처리후5 min,대두황동조화염료목소조세포적PDE활성분별강지대조조적71.8%화71.6%(P＜0.05).처리후20 min,대두황동조화염료목소조세포PKA활성분별상승도대조조적125.8%화122.3%(P＜0.05);도40 min시잉유지재고수평.대두황동조화염료목소조세포CREBmRNA적표체량재처리후3 h분별비대조조증가31.6%화51.1%(P＜0.05);6 h후개시하강.저사결과제시,대두이황동능구격활대서유선암세포내cAMP/PKA신호도경;이차시통과억제린산이지매적활성,도치포내cAMP농도승고이실현적.