中国科学C辑
中國科學C輯
중국과학C집
SCIENCE IN CHINA (SERIES C)
2003年
3期
224-230
,共7页
徐军望%冯德江%宋贵生%魏晓丽%陈蕾%伍晓丽%李旭刚%朱祯
徐軍望%馮德江%宋貴生%魏曉麗%陳蕾%伍曉麗%李旭剛%硃禎
서군망%풍덕강%송귀생%위효려%진뢰%오효려%리욱강%주정
水稻5-烯醇丙酮莽草酸-3-磷酸合酶%内含子%β-葡糖醛酸酶%表达水平
水稻5-烯醇丙酮莽草痠-3-燐痠閤酶%內含子%β-葡糖醛痠酶%錶達水平
수도5-희순병동망초산-3-린산합매%내함자%β-포당철산매%표체수평
分离并克隆了水稻5-烯醇丙酮莽草酸-3-磷酸合酶基因的第一内含子(EPI).序列分析表明,EPI长704 bp,GC含量为36.2%.为进一步研究EPI序列在转基因植物中对外源基因表达水平的影响,将EPI序列插入CaMV35S启动子和报导基因β-葡糖醛酸酶(β-glucuronidase,GUS)基因(gus)之间.采用基因枪法转化烟草叶片,gus基因瞬时表达表明,EPI序列的存在可以使GUS的表达水平提高.利用农杆菌法转化烟草,获得了gus基因稳定表达的植株.GUS活性检测表明EPI内含子的存在可以显著提高GUS基因的表达(P＜0.01).Northern blot分析表明,在转录水平上gus基因在含EPI内含子的转基因植株中的表达高于不含EPI gus基因的表达,并且成熟的gus mRNA中EPI被正确剪取掉了,表明是一种非转译的内含子.GUS定量检测表明,EPI存在可以使GUS的平均表达水平提高3倍,最高单株可提高6倍.
分離併剋隆瞭水稻5-烯醇丙酮莽草痠-3-燐痠閤酶基因的第一內含子(EPI).序列分析錶明,EPI長704 bp,GC含量為36.2%.為進一步研究EPI序列在轉基因植物中對外源基因錶達水平的影響,將EPI序列插入CaMV35S啟動子和報導基因β-葡糖醛痠酶(β-glucuronidase,GUS)基因(gus)之間.採用基因鎗法轉化煙草葉片,gus基因瞬時錶達錶明,EPI序列的存在可以使GUS的錶達水平提高.利用農桿菌法轉化煙草,穫得瞭gus基因穩定錶達的植株.GUS活性檢測錶明EPI內含子的存在可以顯著提高GUS基因的錶達(P＜0.01).Northern blot分析錶明,在轉錄水平上gus基因在含EPI內含子的轉基因植株中的錶達高于不含EPI gus基因的錶達,併且成熟的gus mRNA中EPI被正確剪取掉瞭,錶明是一種非轉譯的內含子.GUS定量檢測錶明,EPI存在可以使GUS的平均錶達水平提高3倍,最高單株可提高6倍.
분리병극륭료수도5-희순병동망초산-3-린산합매기인적제일내함자(EPI).서렬분석표명,EPI장704 bp,GC함량위36.2%.위진일보연구EPI서렬재전기인식물중대외원기인표체수평적영향,장EPI서렬삽입CaMV35S계동자화보도기인β-포당철산매(β-glucuronidase,GUS)기인(gus)지간.채용기인창법전화연초협편,gus기인순시표체표명,EPI서렬적존재가이사GUS적표체수평제고.이용농간균법전화연초,획득료gus기인은정표체적식주.GUS활성검측표명EPI내함자적존재가이현저제고GUS기인적표체(P＜0.01).Northern blot분석표명,재전록수평상gus기인재함EPI내함자적전기인식주중적표체고우불함EPI gus기인적표체,병차성숙적gus mRNA중EPI피정학전취도료,표명시일충비전역적내함자.GUS정량검측표명,EPI존재가이사GUS적평균표체수평제고3배,최고단주가제고6배.
