犬2型腺病毒E3区表达载体的构建
견2형선병독E3구표체재체적구건
The construction of E3 region expressing vector of CAV-2
  • 万方数据
    生物技术通讯 생물기술통신
    LETTERS IN BIOTECHNOLOGY
    2003年 1期 8-11,15 ,共5页

    邱薇%夏成柱%范泉水%扈荣良%王雷%高玉伟%张守峰%孙阳%尹惠琼

    구미%하성주%범천수%호영량%왕뢰%고옥위%장수봉%손양%윤혜경

    犬2型腺病毒%E3区%表达载体 犬2型腺病毒%E3區%錶達載體
    견2형선병독%E3구%표체재체
    利用构建的犬2型腺病毒E3区缺失质粒pBE3L分别构建了含有和不含外源性启动子的绿色荧光蛋白(GFP)基因和狂犬病病毒糖蛋白(Rgp)基因的重组表达质粒pBE3LGFP、pBE3LCGFP、pBE3LRgp和pBE3LCRgp,并分别对DK细胞进行了转染实验,以检测其表达,结果显示,pBE3LCGFP质粒在转染DK细胞后,于36 h即可观察到荧光,72～96 h无明显差别,传3代后仍可见表达荧光的细胞,pBE3LCRgp质粒转染DK细胞后,于48～96 h用间接免疫荧光染色可检测到糖蛋白的表达,而pBE3LGFP和pBE3Rgp质粒转染DK细胞后经检测均无表达,表明构建的E3区缺失性载体不能利用E3区自身的启动子进行目的基因的表达,但利用外源性启动子可使外源基因获得良好表达.
    이용구건적견2형선병독E3구결실질립pBE3L분별구건료함유화불함외원성계동자적록색형광단백(GFP)기인화광견병병독당단백(Rgp)기인적중조표체질립pBE3LGFP、pBE3LCGFP、pBE3LRgp화pBE3LCRgp,병분별대DK세포진행료전염실험,이검측기표체,결과현시,pBE3LCGFP질립재전염DK세포후,우36 h즉가관찰도형광,72～96 h무명현차별,전3대후잉가견표체형광적세포,pBE3LCRgp질립전염DK세포후,우48～96 h용간접면역형광염색가검측도당단백적표체,이pBE3LGFP화pBE3Rgp질립전염DK세포후경검측균무표체,표명구건적E3구결실성재체불능이용E3구자신적계동자진행목적기인적표체,단이용외원성계동자가사외원기인획득량호표체.
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