恙虫病东方体47kDa蛋白基因部分片段的克隆与表达
양충병동방체47kDa단백기인부분편단적극륭여표체
Clone and expression of partial 47kDa gene of Orientia tsutsugamushi
  • 万方数据
    中国人兽共患病杂志 중국인수공환병잡지
    CHINESE JOURNAL OF ZOONOSES
    2003年 1期 13-15 ,共3页

    牛东升%陈香蕊%张雪颖%陈唯军%陈梅玲%崔红%魏文进%温博海

    우동승%진향예%장설영%진유군%진매령%최홍%위문진%온박해

    恙虫病东方体%47kDa基因%克隆%表达 恙蟲病東方體%47kDa基因%剋隆%錶達
    양충병동방체%47kDa기인%극륭%표체
    目的表达恙虫病东方体(Orientia tsutsugamushi,Ot)47kDa保护性抗原蛋白.方法采用PCR方法,从Ot Karp株基因组DNA中扩增出47kDa蛋白基因片段,鉴定后将该片段克隆于原核表达载体pBV220,构建成重组质粒pBV-47.用该重组质粒转化E.coli,转化子在42℃诱导表达并对其鉴定.结果 (1)获得长约1430bp的PCR片段,序列分析结果与已知47kDa基因序列相同;(2)SDS-PAGE检测表达产物,在相对分子量40×103处有表达带;(3)经薄层扫描分析,目的蛋白占全菌蛋白的19%;(4)免疫印迹实验证明其具有免疫反应性.结论获得了47kDa基因片段,并在大肠杆菌中实现了表达,表达产物具有免疫反应性.
    목적표체양충병동방체(Orientia tsutsugamushi,Ot)47kDa보호성항원단백.방법채용PCR방법,종Ot Karp주기인조DNA중확증출47kDa단백기인편단,감정후장해편단극륭우원핵표체재체pBV220,구건성중조질립pBV-47.용해중조질립전화E.coli,전화자재42℃유도표체병대기감정.결과 (1)획득장약1430bp적PCR편단,서렬분석결과여이지47kDa기인서렬상동;(2)SDS-PAGE검측표체산물,재상대분자량40×103처유표체대;(3)경박층소묘분석,목적단백점전균단백적19%;(4)면역인적실험증명기구유면역반응성.결론획득료47kDa기인편단,병재대장간균중실현료표체,표체산물구유면역반응성.
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