中国人兽共患病杂志
中國人獸共患病雜誌
중국인수공환병잡지
CHINESE JOURNAL OF ZOONOSES
2003年
1期
76-77,81
,共3页
王鹏雁%陈创夫%余兴龙%徐兴然%涂长春%张高轩
王鵬雁%陳創伕%餘興龍%徐興然%塗長春%張高軒
왕붕안%진창부%여흥룡%서흥연%도장춘%장고헌
轮状病毒VP4%大肠杆菌肠毒素%融合表达载体
輪狀病毒VP4%大腸桿菌腸毒素%融閤錶達載體
륜상병독VP4%대장간균장독소%융합표체재체
利用DNA重组技术将轮状病毒(Rotavirus RV)VP4蛋白主要抗原编码区基因与产肠毒素大肠杆菌(Enteotoxigenic Escherichia coli ETEC)热稳定肠毒素(Heat-stable enterotoxin Escherichia coli ST)基因融合,插入原核表达质粒pET-28a(+)中,经PCR 、酶切、测序分析表明已将vp4-st 片段克隆入PET-28a(+),而且具有正确的读码框和方向性,正确构建了VP4-ST的融合表达载体pET28a-VP4-ST.表达质粒转化受体菌BL21(DE3 )plysS,取经IPTG诱导后表达的目的蛋白进行SDS-PAGE、凝胶薄层扫描分析.结果表明:表达的目的蛋白以包涵体的形式存在,大小约40.2kDa,表达的蛋白量占菌体总蛋白的13.048%.
利用DNA重組技術將輪狀病毒(Rotavirus RV)VP4蛋白主要抗原編碼區基因與產腸毒素大腸桿菌(Enteotoxigenic Escherichia coli ETEC)熱穩定腸毒素(Heat-stable enterotoxin Escherichia coli ST)基因融閤,插入原覈錶達質粒pET-28a(+)中,經PCR 、酶切、測序分析錶明已將vp4-st 片段剋隆入PET-28a(+),而且具有正確的讀碼框和方嚮性,正確構建瞭VP4-ST的融閤錶達載體pET28a-VP4-ST.錶達質粒轉化受體菌BL21(DE3 )plysS,取經IPTG誘導後錶達的目的蛋白進行SDS-PAGE、凝膠薄層掃描分析.結果錶明:錶達的目的蛋白以包涵體的形式存在,大小約40.2kDa,錶達的蛋白量佔菌體總蛋白的13.048%.
이용DNA중조기술장륜상병독(Rotavirus RV)VP4단백주요항원편마구기인여산장독소대장간균(Enteotoxigenic Escherichia coli ETEC)열은정장독소(Heat-stable enterotoxin Escherichia coli ST)기인융합,삽입원핵표체질립pET-28a(+)중,경PCR 、매절、측서분석표명이장vp4-st 편단극륭입PET-28a(+),이차구유정학적독마광화방향성,정학구건료VP4-ST적융합표체재체pET28a-VP4-ST.표체질립전화수체균BL21(DE3 )plysS,취경IPTG유도후표체적목적단백진행SDS-PAGE、응효박층소묘분석.결과표명:표체적목적단백이포함체적형식존재,대소약40.2kDa,표체적단백량점균체총단백적13.048%.
