CAJ | 학술논문

研究了蜜环菌胞外漆酶合成条件和酶学性质.实验表明,培养基初始pH5.5、培养温度25℃有利于菌株产酶;与麦芽糖、山梨糖和半乳糖相比,纤维二糖和棉子糖作为碳源时漆酶产量更高;有机氮源比无机氮源有利于漆酶合成.泥炭提取液可显著诱导漆酶生成,当其含量为50%时,菌株漆酶最高产量是对照组的7倍.在蜜环菌发酵上清液中检测到3个漆酶同功酶组分,其主要活性(约占75%)组份漆酶A经(NH4)2SO4沉淀、制备级PAGE电泳和阴离子交换柱层析被分离纯化至电泳均一,SDS-PAGE法测得酶亚基分子量59kD,凝胶过滤色谱法测定活性酶分子量58kD.纯化的漆酶A等电点pI为4.0,氧化愈创木酚的最适反应pH为5.6,最适温度为60℃,在60℃和65℃时半衰期分别为45min和36.8min,在pH5.2～7.2范围内稳定性较好.100mmol/L Cl-对该酶有显著抑制作用,1mmol/L SO2-4对漆酶有激活作用,1mmol/L NaN3可完全抑制酶活性,10 mmol/L EDTA对漆酶活没有明显影响,1mmol/L Cu2+对漆酶有激活作用.以愈创木酚为底物时,测得酶的Km=1.026mmol/L,Vnax=5μmol/(min@mg);以ABTS为底物时,测得其Km=0.22mmol/L,Vnax=69μmol/(min@mg).
연구료밀배균포외칠매합성조건화매학성질.실험표명,배양기초시pH5.5、배양온도25℃유리우균주산매;여맥아당、산리당화반유당상비,섬유이당화면자당작위탄원시칠매산량경고;유궤담원비무궤담원유리우칠매합성.니탄제취액가현저유도칠매생성,당기함량위50%시,균주칠매최고산량시대조조적7배.재밀배균발효상청액중검측도3개칠매동공매조분,기주요활성(약점75%)조빈칠매A경(NH4)2SO4침정、제비급PAGE전영화음리자교환주층석피분리순화지전영균일,SDS-PAGE법측득매아기분자량59kD,응효과려색보법측정활성매분자량58kD.순화적칠매A등전점pI위4.0,양화유창목분적최괄반응pH위5.6,최괄온도위60℃,재60℃화65℃시반쇠기분별위45min화36.8min,재pH5.2～7.2범위내은정성교호.100mmol/L Cl-대해매유현저억제작용,1mmol/L SO2-4대칠매유격활작용,1mmol/L NaN3가완전억제매활성,10 mmol/L EDTA대칠매활몰유명현영향,1mmol/L Cu2+대칠매유격활작용.이유창목분위저물시,측득매적Km=1.026mmol/L,Vnax=5μmol/(min@mg);이ABTS위저물시,측득기Km=0.22mmol/L,Vnax=69μmol/(min@mg).