CAJ | 학술논문

目的:建立用EBV转化长寿人群外周血淋巴细胞永生细胞株(LCL)的方法.方法:用EBV转染8份百岁以上健康老人,20份89～99岁健康老人及8份66岁以下健康人的血样共36份.采用20%FBS RPMI1640培养液,配合环孢菌素A、植物血凝素(PHA),置37℃ 5%CO2培养箱内培养.结果:成功地获得24份永生细胞株(其中,百岁老人6份,89～99岁老人12份,66岁以下6份).结论:采血后24～48 h之间接种,转化成功率高.转染后2～3周,大部分标本出现细胞分裂、变形,标志着转化成功.超过5周仍无细胞分裂者即发生细胞凋亡.PHA有缓解细胞凋亡的作用,但不能使细胞分裂.污染是引起转染细胞株凋亡的主要因素.严格的无菌操作、保持培养细胞的适当密度、适时换液、打散较大的细胞克隆团是培养LCL的关键.
목적:건립용EBV전화장수인군외주혈림파세포영생세포주(LCL)적방법.방법:용EBV전염8빈백세이상건강노인,20빈89～99세건강노인급8빈66세이하건강인적혈양공36빈.채용20%FBS RPMI1640배양액,배합배포균소A、식물혈응소(PHA),치37℃ 5%CO2배양상내배양.결과:성공지획득24빈영생세포주(기중,백세노인6빈,89～99세노인12빈,66세이하6빈).결론:채혈후24～48 h지간접충,전화성공솔고.전염후2～3주,대부분표본출현세포분렬、변형,표지착전화성공.초과5주잉무세포분렬자즉발생세포조망.PHA유완해세포조망적작용,단불능사세포분렬.오염시인기전염세포주조망적주요인소.엄격적무균조작、보지배양세포적괄당밀도、괄시환액、타산교대적세포극륭단시배양LCL적관건.