生物化学与生物物理进展
生物化學與生物物理進展
생물화학여생물물리진전
PROGRESS IN BIOCHEMISTRY AND BIOPHYSICS
2002年
3期
444-448
,共5页
王跃祥%官孝群%杨健%莫炜%宋后燕
王躍祥%官孝群%楊健%莫煒%宋後燕
왕약상%관효군%양건%막위%송후연
VEGF121 cDNA克隆,毕赤酵母表达,血管生成,血管通透
VEGF121 cDNA剋隆,畢赤酵母錶達,血管生成,血管通透
VEGF121 cDNA극륭,필적효모표체,혈관생성,혈관통투
应用RT-PCR方法,扩增人VEGF121 cDNA基因片段,与酵母表达载体pPIC9K重组,获得表达质粒p9KVEGF121.该质粒转化毕赤酵母菌GS115,用G418-YPD平板筛选高拷贝转化子,PCR鉴定VEGF121 cDNA与酵母染色体整合状态,高拷贝转化子用甲醇诱导表达.工程菌用5 L发酵罐发酵,表达产物r-hVEGF121占培养液中总蛋白量70%以上.纯化产物促进牛毛细血管内皮(BCE)细胞增殖,并强烈促进血管通透.
應用RT-PCR方法,擴增人VEGF121 cDNA基因片段,與酵母錶達載體pPIC9K重組,穫得錶達質粒p9KVEGF121.該質粒轉化畢赤酵母菌GS115,用G418-YPD平闆篩選高拷貝轉化子,PCR鑒定VEGF121 cDNA與酵母染色體整閤狀態,高拷貝轉化子用甲醇誘導錶達.工程菌用5 L髮酵罐髮酵,錶達產物r-hVEGF121佔培養液中總蛋白量70%以上.純化產物促進牛毛細血管內皮(BCE)細胞增殖,併彊烈促進血管通透.
응용RT-PCR방법,확증인VEGF121 cDNA기인편단,여효모표체재체pPIC9K중조,획득표체질립p9KVEGF121.해질립전화필적효모균GS115,용G418-YPD평판사선고고패전화자,PCR감정VEGF121 cDNA여효모염색체정합상태,고고패전화자용갑순유도표체.공정균용5 L발효관발효,표체산물r-hVEGF121점배양액중총단백량70%이상.순화산물촉진우모세혈관내피(BCE)세포증식,병강렬촉진혈관통투.
