微生物学报
微生物學報
미생물학보
ACTA MICROBIOLOGICA SINICA
2002年
1期
50-55
,共6页
季平%查新民%张国英%于继彬%顾维%沈卫德
季平%查新民%張國英%于繼彬%顧維%瀋衛德
계평%사신민%장국영%우계빈%고유%침위덕
苜蓿尺蠖核型多角体病毒%多角体蛋白%家蚕核型多角体病毒%异源包装
苜蓿呎蠖覈型多角體病毒%多角體蛋白%傢蠶覈型多角體病毒%異源包裝
목숙척확핵형다각체병독%다각체단백%가잠핵형다각체병독%이원포장
利用PCR方法从AcMNPV基因组DNA中分离出多角体蛋白基因,将该扩增片段克隆到转移载体pBacPAK8中,得到重组转移载体pOAc.将该质粒DNA与线性化的Bm-BacPAk6病毒基因组DNA共传染BmN细胞,得到了能形成多角体且不产生蓝色空斑的重组病毒hp-BmNPV.纯化该重组病毒的多角体颗粒,并对多角体蛋白、病毒核酸及多角体病毒颗粒进行分析,发现AcMNPV的多角体蛋白能在家蚕细胞中大量表达且能在细胞内识别家蚕核型多角体病毒并组装成多角体颗粒;病毒基因组DNA因部分交换,其酶切行为发生了相应的变化;电镜观察发现经AcMNPV多角体蛋白包装的家蚕核型多角体病毒的多角体颗粒大小为1.2μm～2.9μm,明显小于野生型家蚕核型多角体病毒的多角体颗粒.
利用PCR方法從AcMNPV基因組DNA中分離齣多角體蛋白基因,將該擴增片段剋隆到轉移載體pBacPAK8中,得到重組轉移載體pOAc.將該質粒DNA與線性化的Bm-BacPAk6病毒基因組DNA共傳染BmN細胞,得到瞭能形成多角體且不產生藍色空斑的重組病毒hp-BmNPV.純化該重組病毒的多角體顆粒,併對多角體蛋白、病毒覈痠及多角體病毒顆粒進行分析,髮現AcMNPV的多角體蛋白能在傢蠶細胞中大量錶達且能在細胞內識彆傢蠶覈型多角體病毒併組裝成多角體顆粒;病毒基因組DNA因部分交換,其酶切行為髮生瞭相應的變化;電鏡觀察髮現經AcMNPV多角體蛋白包裝的傢蠶覈型多角體病毒的多角體顆粒大小為1.2μm～2.9μm,明顯小于野生型傢蠶覈型多角體病毒的多角體顆粒.
이용PCR방법종AcMNPV기인조DNA중분리출다각체단백기인,장해확증편단극륭도전이재체pBacPAK8중,득도중조전이재체pOAc.장해질립DNA여선성화적Bm-BacPAk6병독기인조DNA공전염BmN세포,득도료능형성다각체차불산생람색공반적중조병독hp-BmNPV.순화해중조병독적다각체과립,병대다각체단백、병독핵산급다각체병독과립진행분석,발현AcMNPV적다각체단백능재가잠세포중대량표체차능재세포내식별가잠핵형다각체병독병조장성다각체과립;병독기인조DNA인부분교환,기매절행위발생료상응적변화;전경관찰발현경AcMNPV다각체단백포장적가잠핵형다각체병독적다각체과립대소위1.2μm～2.9μm,명현소우야생형가잠핵형다각체병독적다각체과립.
