四川大学学报(自然科学版)
四川大學學報(自然科學版)
사천대학학보(자연과학판)
JOURNAL OF SICHUAN UNIVERSITY
2002年
2期
340-344
,共5页
粗毛栓菌%基因启动子%Hygr基因%启动子探针型载体
粗毛栓菌%基因啟動子%Hygr基因%啟動子探針型載體
조모전균%기인계동자%Hygr기인%계동자탐침형재체
粗毛栓菌(Trametes gallic)总DNA经Sau3A I酶切后插入到启动子探针型载体pSUPV8的BamHI位点,在含氨苄青霉素与潮霉素双抗平板上筛选到8个潮霉素抗性(Hygr)重组子(命名为pTP1～8),其插入片段大小为0.5～1.7kb,抗性水平为0.15×10-3～0.35×10-3g/mL.对pTP6进行酶切分析表明,插入片段中含有KpnI,XbaI和SacI位点各一个,用限制酶SacI和XbaI去掉其5'端0.7kb和1.2kb片段后,其潮霉素抗性由0.25×10-3g/mL均降为0.15×10-3g/mL.将TP5片段与粗毛栓菌总DNA进行Southern杂交,结果证明,TP5片段来源于粗毛栓菌总DNA.对片段TP5的3'端进行序列分析,发现它存在真核生物和原核生物基因启动子的保守序列.
粗毛栓菌(Trametes gallic)總DNA經Sau3A I酶切後插入到啟動子探針型載體pSUPV8的BamHI位點,在含氨芐青黴素與潮黴素雙抗平闆上篩選到8箇潮黴素抗性(Hygr)重組子(命名為pTP1～8),其插入片段大小為0.5～1.7kb,抗性水平為0.15×10-3～0.35×10-3g/mL.對pTP6進行酶切分析錶明,插入片段中含有KpnI,XbaI和SacI位點各一箇,用限製酶SacI和XbaI去掉其5'耑0.7kb和1.2kb片段後,其潮黴素抗性由0.25×10-3g/mL均降為0.15×10-3g/mL.將TP5片段與粗毛栓菌總DNA進行Southern雜交,結果證明,TP5片段來源于粗毛栓菌總DNA.對片段TP5的3'耑進行序列分析,髮現它存在真覈生物和原覈生物基因啟動子的保守序列.
조모전균(Trametes gallic)총DNA경Sau3A I매절후삽입도계동자탐침형재체pSUPV8적BamHI위점,재함안변청매소여조매소쌍항평판상사선도8개조매소항성(Hygr)중조자(명명위pTP1～8),기삽입편단대소위0.5～1.7kb,항성수평위0.15×10-3～0.35×10-3g/mL.대pTP6진행매절분석표명,삽입편단중함유KpnI,XbaI화SacI위점각일개,용한제매SacI화XbaI거도기5'단0.7kb화1.2kb편단후,기조매소항성유0.25×10-3g/mL균강위0.15×10-3g/mL.장TP5편단여조모전균총DNA진행Southern잡교,결과증명,TP5편단래원우조모전균총DNA.대편단TP5적3'단진행서렬분석,발현타존재진핵생물화원핵생물기인계동자적보수서렬.
