基础医学与临床
基礎醫學與臨床
기출의학여림상
BASIC MEDICAL SCIENCES AND CLINICS
2002年
1期
59-62
,共4页
谢振华%王爱民%马春%刘长振%刘明%杨歌德%贺雨虹
謝振華%王愛民%馬春%劉長振%劉明%楊歌德%賀雨虹
사진화%왕애민%마춘%류장진%류명%양가덕%하우홍
PC12细胞%硫氧还蛋白%RT-PCR%克隆和表达
PC12細胞%硫氧還蛋白%RT-PCR%剋隆和錶達
PC12세포%류양환단백%RT-PCR%극륭화표체
硫氧还蛋白(Thioredoxin, TRX)是广泛存在于原核和真核细胞中的低分子量蛋白质,它含有保守的Cys-Gly-Pro-Cys活性位点,作为多效性细胞因子而具有重要的生物学功能.从PC12细胞中提取总RNA,经逆转录PCR(RT-PCR)扩增出硫氧还蛋白cDNA并克隆到PUC18质粒上.序列分析表明,克隆所得序列与GenBank中大鼠硫氧还蛋白cDNA序列完全一致.将该基因亚克隆到表达质粒pQE30上,质粒pQE30-TRX在大肠杆菌M15中获得高效表达.带6His的融合蛋白约占总菌体蛋白的30%.分析鉴定表明,纯化的融合蛋白质分子量是14kD,且具有二硫键还原酶活性.
硫氧還蛋白(Thioredoxin, TRX)是廣汎存在于原覈和真覈細胞中的低分子量蛋白質,它含有保守的Cys-Gly-Pro-Cys活性位點,作為多效性細胞因子而具有重要的生物學功能.從PC12細胞中提取總RNA,經逆轉錄PCR(RT-PCR)擴增齣硫氧還蛋白cDNA併剋隆到PUC18質粒上.序列分析錶明,剋隆所得序列與GenBank中大鼠硫氧還蛋白cDNA序列完全一緻.將該基因亞剋隆到錶達質粒pQE30上,質粒pQE30-TRX在大腸桿菌M15中穫得高效錶達.帶6His的融閤蛋白約佔總菌體蛋白的30%.分析鑒定錶明,純化的融閤蛋白質分子量是14kD,且具有二硫鍵還原酶活性.
류양환단백(Thioredoxin, TRX)시엄범존재우원핵화진핵세포중적저분자량단백질,타함유보수적Cys-Gly-Pro-Cys활성위점,작위다효성세포인자이구유중요적생물학공능.종PC12세포중제취총RNA,경역전록PCR(RT-PCR)확증출류양환단백cDNA병극륭도PUC18질립상.서렬분석표명,극륭소득서렬여GenBank중대서류양환단백cDNA서렬완전일치.장해기인아극륭도표체질립pQE30상,질립pQE30-TRX재대장간균M15중획득고효표체.대6His적융합단백약점총균체단백적30%.분석감정표명,순화적융합단백질분자량시14kD,차구유이류건환원매활성.
