中国兽医学报
中國獸醫學報
중국수의학보
CHINESE JOURNAL OF VETERINARY SCIENCE
2007年
3期
300-304
,共5页
岳华%俞宁%汤承%李名杨
嶽華%俞寧%湯承%李名楊
악화%유저%탕승%리명양
鸡新城疫病毒%毒力%荧光定量RT-PCR%诊断
鷄新城疫病毒%毒力%熒光定量RT-PCR%診斷
계신성역병독%독력%형광정량RT-PCR%진단
根据新城疫病毒(NDV)核苷酸序列,设计针对中、强毒力NDV F基因编码融合蛋白裂解位点的核苷酸序列引物和TaqMan探针,建立了实时荧光定量反转录荧光定量PCR(RRT-PCR)检测中、强毒力NDV RNA的方法.该方法能从含有NDV Ⅰ系疫苗毒、NDV标准强毒株F48E9(基因Ⅸ型)、分离鸡源强毒株(基因Ⅶ型)和鸽源强毒株(基因Ⅵ型)样本中检出NDV RNA,不与NDV弱毒株(LaSota、Clone 30、B1、V4)、传染性支气管炎病毒、传染性喉气管炎病毒、传染性法氏囊炎病毒及健康鸡组织RNA发生交叉反应,对NDV核酸的最小检出量为60个拷贝,具有检测速度快、特异性强、灵敏度高、重复性和稳定性好等特点.从9个临床样本中均检测出阳性信号(9/9),PCR产物经测序证明均含有NDV强毒株F基因裂解位点;用其中8份病料接种SPF鸡胚分离病毒,分离率为5/8.
根據新城疫病毒(NDV)覈苷痠序列,設計針對中、彊毒力NDV F基因編碼融閤蛋白裂解位點的覈苷痠序列引物和TaqMan探針,建立瞭實時熒光定量反轉錄熒光定量PCR(RRT-PCR)檢測中、彊毒力NDV RNA的方法.該方法能從含有NDV Ⅰ繫疫苗毒、NDV標準彊毒株F48E9(基因Ⅸ型)、分離鷄源彊毒株(基因Ⅶ型)和鴿源彊毒株(基因Ⅵ型)樣本中檢齣NDV RNA,不與NDV弱毒株(LaSota、Clone 30、B1、V4)、傳染性支氣管炎病毒、傳染性喉氣管炎病毒、傳染性法氏囊炎病毒及健康鷄組織RNA髮生交扠反應,對NDV覈痠的最小檢齣量為60箇拷貝,具有檢測速度快、特異性彊、靈敏度高、重複性和穩定性好等特點.從9箇臨床樣本中均檢測齣暘性信號(9/9),PCR產物經測序證明均含有NDV彊毒株F基因裂解位點;用其中8份病料接種SPF鷄胚分離病毒,分離率為5/8.
근거신성역병독(NDV)핵감산서렬,설계침대중、강독력NDV F기인편마융합단백렬해위점적핵감산서렬인물화TaqMan탐침,건립료실시형광정량반전록형광정량PCR(RRT-PCR)검측중、강독력NDV RNA적방법.해방법능종함유NDV Ⅰ계역묘독、NDV표준강독주F48E9(기인Ⅸ형)、분리계원강독주(기인Ⅶ형)화합원강독주(기인Ⅵ형)양본중검출NDV RNA,불여NDV약독주(LaSota、Clone 30、B1、V4)、전염성지기관염병독、전염성후기관염병독、전염성법씨낭염병독급건강계조직RNA발생교차반응,대NDV핵산적최소검출량위60개고패,구유검측속도쾌、특이성강、령민도고、중복성화은정성호등특점.종9개림상양본중균검측출양성신호(9/9),PCR산물경측서증명균함유NDV강독주F기인렬해위점;용기중8빈병료접충SPF계배분리병독,분리솔위5/8.
