中国癌症杂志
中國癌癥雜誌
중국암증잡지
CHINA ONCOLOGY
2008年
1期
1-5
,共5页
孔伟%甘愉%胡晶莹%朱明洁%赵仰星%赵新泰
孔偉%甘愉%鬍晶瑩%硃明潔%趙仰星%趙新泰
공위%감유%호정형%주명길%조앙성%조신태
肝癌抑制基因%功能序列%转运%免疫荧光共聚焦
肝癌抑製基因%功能序列%轉運%免疫熒光共聚焦
간암억제기인%공능서렬%전운%면역형광공취초
背景与目的:肝癌抑制基因-1(HCCS1)是一种潜在的肝癌抑制基因,并且在细胞内蛋白分拣运输中也发挥着重要作用,其抑癌作用有可能是通过其蛋白转运的功能而发挥的,本文以寻找HCCS1序列中与转运相关的最小功能序列区域为目的.方法:通过亚克隆技术,构建以pEGFP-C2为载体的含不同长度HCCS1cDNA片段的亚克隆,将构建的亚克隆转染子宫颈癌HeLa细胞,通过免疫荧光共聚焦显微镜观察不同长度HCCS1蛋白的分布,以及与6-磷酸甘露糖受体(M6PR)的共定位.结果:成功构建了以pEGFP-C2为载体的10个含有不同长度HCCS1片段的亚克隆;HCCS1cDNA从3'端向5'端逐渐缺失的片段中:2 100 bp片段至778 bp片段编码的不同长度HCCS1蛋白呈颗粒状分布于核周的胞质内,其中2 100 bp片段至1 571 bp片段编码的不同长度HCCS1蛋白均呈颗粒状、极性分布于核周的胞质内,且与M6PR有共定位;而1 120 bp片段至778 bp片段编码的不同长度HCCS1蛋白虽然也呈颗粒状分布于核周,但极性分布消失,且与M6PR共定位消失;HCCS1cDNA片段678 bp片段至339 bp片段编码的不同长度HCCS1蛋白呈散点状弥散分布于胞质以及胞核内.结论:确定了HCCS1cDNA 1 571 bp片段的3'端451 bp的序列为与HCCS1转运功能相关的最小区域范围.
揹景與目的:肝癌抑製基因-1(HCCS1)是一種潛在的肝癌抑製基因,併且在細胞內蛋白分揀運輸中也髮揮著重要作用,其抑癌作用有可能是通過其蛋白轉運的功能而髮揮的,本文以尋找HCCS1序列中與轉運相關的最小功能序列區域為目的.方法:通過亞剋隆技術,構建以pEGFP-C2為載體的含不同長度HCCS1cDNA片段的亞剋隆,將構建的亞剋隆轉染子宮頸癌HeLa細胞,通過免疫熒光共聚焦顯微鏡觀察不同長度HCCS1蛋白的分佈,以及與6-燐痠甘露糖受體(M6PR)的共定位.結果:成功構建瞭以pEGFP-C2為載體的10箇含有不同長度HCCS1片段的亞剋隆;HCCS1cDNA從3'耑嚮5'耑逐漸缺失的片段中:2 100 bp片段至778 bp片段編碼的不同長度HCCS1蛋白呈顆粒狀分佈于覈週的胞質內,其中2 100 bp片段至1 571 bp片段編碼的不同長度HCCS1蛋白均呈顆粒狀、極性分佈于覈週的胞質內,且與M6PR有共定位;而1 120 bp片段至778 bp片段編碼的不同長度HCCS1蛋白雖然也呈顆粒狀分佈于覈週,但極性分佈消失,且與M6PR共定位消失;HCCS1cDNA片段678 bp片段至339 bp片段編碼的不同長度HCCS1蛋白呈散點狀瀰散分佈于胞質以及胞覈內.結論:確定瞭HCCS1cDNA 1 571 bp片段的3'耑451 bp的序列為與HCCS1轉運功能相關的最小區域範圍.
배경여목적:간암억제기인-1(HCCS1)시일충잠재적간암억제기인,병차재세포내단백분간운수중야발휘착중요작용,기억암작용유가능시통과기단백전운적공능이발휘적,본문이심조HCCS1서렬중여전운상관적최소공능서렬구역위목적.방법:통과아극륭기술,구건이pEGFP-C2위재체적함불동장도HCCS1cDNA편단적아극륭,장구건적아극륭전염자궁경암HeLa세포,통과면역형광공취초현미경관찰불동장도HCCS1단백적분포,이급여6-린산감로당수체(M6PR)적공정위.결과:성공구건료이pEGFP-C2위재체적10개함유불동장도HCCS1편단적아극륭;HCCS1cDNA종3'단향5'단축점결실적편단중:2 100 bp편단지778 bp편단편마적불동장도HCCS1단백정과립상분포우핵주적포질내,기중2 100 bp편단지1 571 bp편단편마적불동장도HCCS1단백균정과립상、겁성분포우핵주적포질내,차여M6PR유공정위;이1 120 bp편단지778 bp편단편마적불동장도HCCS1단백수연야정과립상분포우핵주,단겁성분포소실,차여M6PR공정위소실;HCCS1cDNA편단678 bp편단지339 bp편단편마적불동장도HCCS1단백정산점상미산분포우포질이급포핵내.결론:학정료HCCS1cDNA 1 571 bp편단적3'단451 bp적서렬위여HCCS1전운공능상관적최소구역범위.
