医学分子生物学杂志
醫學分子生物學雜誌
의학분자생물학잡지
FOREIGN MEDICAL SCIENCES
2010年
6期
499-503
,共5页
杜艳%杨婉薇%马展%杨翠霞%刘一文%何怡青%王颖智%高锋
杜豔%楊婉薇%馬展%楊翠霞%劉一文%何怡青%王穎智%高鋒
두염%양완미%마전%양취하%류일문%하이청%왕영지%고봉
透明质酸受体-1%质粒构建%非洲绿猴肾细胞
透明質痠受體-1%質粒構建%非洲綠猴腎細胞
투명질산수체-1%질립구건%비주록후신세포
目的 构建人淋巴管内皮细胞特异标志物LYVE-1融合基因表达质粒,观察其在COS-7细胞中的表达,为进一步探讨该标志物在肿瘤淋巴转移中的作用提供工具.方法 从本院结肠癌根治术患者术所取组织中的淋巴结抽提总RNA,RT-PCR扩增LYVE-1基因片段,并将其插入pMD19-T Simple Vector进行测序,鉴定正确后构建pcDNA3.1(+)-LYVE-1并转染COS-7细胞,RT-PCR、Western印迹检测目的 蛋白表达,间接免疫荧光检测该基因表达在COS-7细胞上.结果 成功获取了人淋巴管内皮细胞特异标志物LYVE-1全长cDNA,构建了其真核表达载体pcDNA3.1(+)-LYVE-1,转染COS-7细胞后检测出目的 蛋白的表达,并且证明该基因表达在细胞上.结论 成功构建了pcDNA3.1(+)-LYVE-1重组质粒,为进一步研究LYVE-1在肿瘤淋巴管转移中的功能提供了重要的实验材料.
目的 構建人淋巴管內皮細胞特異標誌物LYVE-1融閤基因錶達質粒,觀察其在COS-7細胞中的錶達,為進一步探討該標誌物在腫瘤淋巴轉移中的作用提供工具.方法 從本院結腸癌根治術患者術所取組織中的淋巴結抽提總RNA,RT-PCR擴增LYVE-1基因片段,併將其插入pMD19-T Simple Vector進行測序,鑒定正確後構建pcDNA3.1(+)-LYVE-1併轉染COS-7細胞,RT-PCR、Western印跡檢測目的 蛋白錶達,間接免疫熒光檢測該基因錶達在COS-7細胞上.結果 成功穫取瞭人淋巴管內皮細胞特異標誌物LYVE-1全長cDNA,構建瞭其真覈錶達載體pcDNA3.1(+)-LYVE-1,轉染COS-7細胞後檢測齣目的 蛋白的錶達,併且證明該基因錶達在細胞上.結論 成功構建瞭pcDNA3.1(+)-LYVE-1重組質粒,為進一步研究LYVE-1在腫瘤淋巴管轉移中的功能提供瞭重要的實驗材料.
목적 구건인림파관내피세포특이표지물LYVE-1융합기인표체질립,관찰기재COS-7세포중적표체,위진일보탐토해표지물재종류림파전이중적작용제공공구.방법 종본원결장암근치술환자술소취조직중적림파결추제총RNA,RT-PCR확증LYVE-1기인편단,병장기삽입pMD19-T Simple Vector진행측서,감정정학후구건pcDNA3.1(+)-LYVE-1병전염COS-7세포,RT-PCR、Western인적검측목적 단백표체,간접면역형광검측해기인표체재COS-7세포상.결과 성공획취료인림파관내피세포특이표지물LYVE-1전장cDNA,구건료기진핵표체재체pcDNA3.1(+)-LYVE-1,전염COS-7세포후검측출목적 단백적표체,병차증명해기인표체재세포상.결론 성공구건료pcDNA3.1(+)-LYVE-1중조질립,위진일보연구LYVE-1재종류림파관전이중적공능제공료중요적실험재료.
