人细胞外基质磷酸糖蛋白MEPE的表达纯化及抗体制备
인세포외기질린산당단백MEPE적표체순화급항체제비
Expression and purification of Mepe and preparation of its polyclonal antibody
  • 万方数据
    军事医学 군사의학
    BULLETIN OF THE ACADEMY OF MILITARY MEDICAL SCIENCES
    2011年 1期 39-43 ,共5页

    马祖兴%高宁%绳纪坡%于芳%林宇翔%罗维%柯波%胡宝成

    마조흥%고저%승기파%우방%림우상%라유%가파%호보성

    细胞外基质磷酸糖蛋白%表达纯化%多克隆抗体 細胞外基質燐痠糖蛋白%錶達純化%多剋隆抗體
    세포외기질린산당단백%표체순화%다극륭항체
    目的 原核表达、纯化人细胞外基质磷酸糖蛋白(Mepe)基因,并制备多克隆抗体.方法 设计出扩增人Mepe全长基因的特异引物,通过PCR扩增出该基因片段,测序正确后插入到含GST基因的原核表达载体pGEX-KG中,以IPTG诱导表达,并经谷胱甘肽琼脂糖珠纯化融合蛋白;用纯化的蛋白免疫小鼠制备多克隆抗体,用ELISA测定抗体的效价,Western印迹鉴定抗体的特异性.结果 原核表达了人Mepe全长基因,纯化了MEPE蛋白,并获得了抗MEPE的多克隆抗体,抗体效价达到1∶25 600,Western印迹结果显示,该抗血清能够特异识别原核及真核细胞表达的MEPE蛋白.结论 MEPE蛋白能够诱导小鼠产生具有较高效价和特异性的多克隆抗体,为进一步研究MEPE的功能奠定了基础.
    목적 원핵표체、순화인세포외기질린산당단백(Mepe)기인,병제비다극륭항체.방법 설계출확증인Mepe전장기인적특이인물,통과PCR확증출해기인편단,측서정학후삽입도함GST기인적원핵표체재체pGEX-KG중,이IPTG유도표체,병경곡광감태경지당주순화융합단백;용순화적단백면역소서제비다극륭항체,용ELISA측정항체적효개,Western인적감정항체적특이성.결과 원핵표체료인Mepe전장기인,순화료MEPE단백,병획득료항MEPE적다극륭항체,항체효개체도1∶25 600,Western인적결과현시,해항혈청능구특이식별원핵급진핵세포표체적MEPE단백.결론 MEPE단백능구유도소서산생구유교고효개화특이성적다극륭항체,위진일보연구MEPE적공능전정료기출.
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