中西医结合学报
中西醫結閤學報
중서의결합학보
JOURNAL OF CHINESE INTEGRATIVE MDEICINE
2011年
12期
1339-1346
,共8页
叶媚娜%陈红风%周瑞娟%摩明娟
葉媚娜%陳紅風%週瑞娟%摩明娟
협미나%진홍풍%주서연%마명연
黄芪多糖%乳腺肿瘤%基底细胞样型乳腺癌%Akt磷酸化%MDA-MB-468细胞株%细胞增殖%PTEN磷酸水解酶
黃芪多糖%乳腺腫瘤%基底細胞樣型乳腺癌%Akt燐痠化%MDA-MB-468細胞株%細胞增殖%PTEN燐痠水解酶
황기다당%유선종류%기저세포양형유선암%Akt린산화%MDA-MB-468세포주%세포증식%PTEN린산수해매
目的:观察黄芪多精对基底细胞样乳腺癌细胞株MDA-MB-468细胞增殖和Akt蛋白磷酸化的影响.方法:用不同浓度的黄芪多耱(Astragalus polysaccharide,APS)干预MDA-MB-468细胞,用甲基噻唑基四唑法检测不同浓度APS干预对MDA-MB-468细胞增殖的量效和时效关系.用细胞内蛋白质印迹法检测APS干预MDA-MB-468细胞株l、2、4和7d后对磷酸化Akt(phospho-Akt,p-Akt) (Thr308)和p-Akt (Ser473)蛋白表达水平的影响,以及p53/鼠双微体2(murine double minute 2,MDM2)信号转导通路中的关键靶点p53、MDM2和人第10号染色体上磷酸酶和张力蛋白同源缺失的基因(phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten,PTEN)蛋白表达水平的影响.用小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)技术沉默PTEN的表达,用细胞内蛋白质印迹法检测APS干预MDA-MB-468细胞2d对p-Akt(Thr308)和p-Akt(Ser473)蛋白表达水平的影响.结果:1和0.5 mg/mL的APS对MDA-MB-468细胞的增殖有明显的抑制作用.1和0.5 mg/mL的APS干预1、2、4和7d后能下调p-Akt(Thr308)的表达;干预1和2d后下调p-Akt(Ser473)的表达,上调MDM2蛋白的表达；干预7d后上调p53和PTEN蛋白的表达.PTEN沉默后,APS在干预2d后对p-Akt(Thr308)和p-Akt(Ser473)的表达没有影响,细胞增殖的抑制率低于PTEN未沉默时.结论:APS能抑制MDA-MB-468细胞的增殖,下调MDA-MB-468细胞Akt磷酸化的水平,其抑制MDA-MB-468细胞增殖的机制可能与通过对p53/MDM2正负反馈环的调节从而上调p53和PTEN蛋白的表达有关.
目的:觀察黃芪多精對基底細胞樣乳腺癌細胞株MDA-MB-468細胞增殖和Akt蛋白燐痠化的影響.方法:用不同濃度的黃芪多耱(Astragalus polysaccharide,APS)榦預MDA-MB-468細胞,用甲基噻唑基四唑法檢測不同濃度APS榦預對MDA-MB-468細胞增殖的量效和時效關繫.用細胞內蛋白質印跡法檢測APS榦預MDA-MB-468細胞株l、2、4和7d後對燐痠化Akt(phospho-Akt,p-Akt) (Thr308)和p-Akt (Ser473)蛋白錶達水平的影響,以及p53/鼠雙微體2(murine double minute 2,MDM2)信號轉導通路中的關鍵靶點p53、MDM2和人第10號染色體上燐痠酶和張力蛋白同源缺失的基因(phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten,PTEN)蛋白錶達水平的影響.用小榦擾RNA(small interfering RNA,siRNA)技術沉默PTEN的錶達,用細胞內蛋白質印跡法檢測APS榦預MDA-MB-468細胞2d對p-Akt(Thr308)和p-Akt(Ser473)蛋白錶達水平的影響.結果:1和0.5 mg/mL的APS對MDA-MB-468細胞的增殖有明顯的抑製作用.1和0.5 mg/mL的APS榦預1、2、4和7d後能下調p-Akt(Thr308)的錶達;榦預1和2d後下調p-Akt(Ser473)的錶達,上調MDM2蛋白的錶達；榦預7d後上調p53和PTEN蛋白的錶達.PTEN沉默後,APS在榦預2d後對p-Akt(Thr308)和p-Akt(Ser473)的錶達沒有影響,細胞增殖的抑製率低于PTEN未沉默時.結論:APS能抑製MDA-MB-468細胞的增殖,下調MDA-MB-468細胞Akt燐痠化的水平,其抑製MDA-MB-468細胞增殖的機製可能與通過對p53/MDM2正負反饋環的調節從而上調p53和PTEN蛋白的錶達有關.
목적:관찰황기다정대기저세포양유선암세포주MDA-MB-468세포증식화Akt단백린산화적영향.방법:용불동농도적황기다마(Astragalus polysaccharide,APS)간예MDA-MB-468세포,용갑기새서기사서법검측불동농도APS간예대MDA-MB-468세포증식적량효화시효관계.용세포내단백질인적법검측APS간예MDA-MB-468세포주l、2、4화7d후대린산화Akt(phospho-Akt,p-Akt) (Thr308)화p-Akt (Ser473)단백표체수평적영향,이급p53/서쌍미체2(murine double minute 2,MDM2)신호전도통로중적관건파점p53、MDM2화인제10호염색체상린산매화장력단백동원결실적기인(phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten,PTEN)단백표체수평적영향.용소간우RNA(small interfering RNA,siRNA)기술침묵PTEN적표체,용세포내단백질인적법검측APS간예MDA-MB-468세포2d대p-Akt(Thr308)화p-Akt(Ser473)단백표체수평적영향.결과:1화0.5 mg/mL적APS대MDA-MB-468세포적증식유명현적억제작용.1화0.5 mg/mL적APS간예1、2、4화7d후능하조p-Akt(Thr308)적표체;간예1화2d후하조p-Akt(Ser473)적표체,상조MDM2단백적표체；간예7d후상조p53화PTEN단백적표체.PTEN침묵후,APS재간예2d후대p-Akt(Thr308)화p-Akt(Ser473)적표체몰유영향,세포증식적억제솔저우PTEN미침묵시.결론:APS능억제MDA-MB-468세포적증식,하조MDA-MB-468세포Akt린산화적수평,기억제MDA-MB-468세포증식적궤제가능여통과대p53/MDM2정부반궤배적조절종이상조p53화PTEN단백적표체유관.
