人心肌肌球蛋白轻链基因启动子驱动的GFP和Luc报告基因在人心肌细胞系中的表达
인심기기구단백경련기인계동자구동적GFP화Luc보고기인재인심기세포계중적표체
Expression of GFP and Luc reporter genes driven by human myocardial myosin light chain gene promoter in human cardiomyocytes
  • 万方数据
    中国病理生理杂志 중국병리생리잡지
    CHINESE JOURNAL OF PATHOPHYSIOLOGY
    2012年 9期 1722-1728 ,共7页

    许秀芳%辛毅%汪劲松%赵莉敏%杜兰萍%葛桂玲%李娜%张颖%王世强%黄益民%罗毅

    허수방%신의%왕경송%조리민%두란평%갈계령%리나%장영%왕세강%황익민%라의

    肌球蛋白轻链%绿色荧光蛋白%萤光素酶%心肌细胞 肌毬蛋白輕鏈%綠色熒光蛋白%螢光素酶%心肌細胞
    기구단백경련%록색형광단백%형광소매%심기세포
    目的:构建人肌球蛋白2v基因启动子(pMLC2v)驱动的绿色荧光蛋白(GFP)和萤光素酶(Luc)报告基因慢病毒载体并观察其在人心肌细胞系(HCM)和人肺癌细胞株A549中的整合表达特征.方法:应用去毒化的人类I型免疫缺陷病毒和pMLC2v-GFP或pMLC2v-Luc报告基因构建慢病毒示踪载体,转染HCM和A549细胞,激光共聚焦显微镜及生物发光检测仪观察2种报告基因在不同细胞生长进程中的表达特征.非特异性启动子驱动的GFP(GFPC)和红色荧光蛋白(RFPC)报告基因作为对照.结果:2种细胞转染GFPC和RFPC后第3 d,都表达GFP和RFP;而HCM只在转染pMLC2v-GFP和pMLC2v-Luc 21 d后表达GFP和Luc,A549细胞不表达.结论:pMLC2v主要在培养21 d后新增殖的人心肌细胞中驱动GFP和Luc报告基因表达,这为监测干细胞向心肌细胞的分化进程提供了可靠的病理及活体示踪工具.
    목적:구건인기구단백2v기인계동자(pMLC2v)구동적록색형광단백(GFP)화형광소매(Luc)보고기인만병독재체병관찰기재인심기세포계(HCM)화인폐암세포주A549중적정합표체특정.방법:응용거독화적인류I형면역결함병독화pMLC2v-GFP혹pMLC2v-Luc보고기인구건만병독시종재체,전염HCM화A549세포,격광공취초현미경급생물발광검측의관찰2충보고기인재불동세포생장진정중적표체특정.비특이성계동자구동적GFP(GFPC)화홍색형광단백(RFPC)보고기인작위대조.결과:2충세포전염GFPC화RFPC후제3 d,도표체GFP화RFP;이HCM지재전염pMLC2v-GFP화pMLC2v-Luc 21 d후표체GFP화Luc,A549세포불표체.결론:pMLC2v주요재배양21 d후신증식적인심기세포중구동GFP화Luc보고기인표체,저위감측간세포향심기세포적분화진정제공료가고적병리급활체시종공구.
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