肝胆外科杂志
肝膽外科雜誌
간담외과잡지
JOURNAL OF HEPATOBILIARY SURGERY
2003年
4期
300-303
,共4页
程虹%刘彦仿%张惠中%沈万安%陶开山%张静%马福成
程虹%劉彥倣%張惠中%瀋萬安%陶開山%張靜%馬福成
정홍%류언방%장혜중%침만안%도개산%장정%마복성
肝细胞肝癌%免疫毒素%绿色荧光蛋白(GFP)%基因表达
肝細胞肝癌%免疫毒素%綠色熒光蛋白(GFP)%基因錶達
간세포간암%면역독소%록색형광단백(GFP)%기인표체
目的构建分泌型抗肝癌单链免疫毒素真核表达载体并在人肝癌细胞系SMMC-7721中表达.方法采用PCR方法在抗肝癌sFv 的5′端引入引导序列使其能够在真核细胞中表达并分泌,在其下游连接人TNF-α基因,构建分泌型抗肝癌单链免疫毒素基因,并将该基因克隆入带有GFP报告基因的真核表达载体,用磷酸钙共沉淀法转染人肝癌细胞系SMMC-7721进行瞬时表达.结果 DNA序列分析证实在sFv 的5′端引入正确的60 bp引导肽序列, 酶切鉴定证明成功构建了分泌型抗肝癌单链免疫毒素融合GFP真核表达载体,并在SMMC-7721细胞中成功地表达了融合荧光蛋白.结论成功构建并表达了分泌型抗肝癌单链免疫毒素融合GFP基因,为肝癌免疫基因治疗的进一步研究奠定了基础.
目的構建分泌型抗肝癌單鏈免疫毒素真覈錶達載體併在人肝癌細胞繫SMMC-7721中錶達.方法採用PCR方法在抗肝癌sFv 的5′耑引入引導序列使其能夠在真覈細胞中錶達併分泌,在其下遊連接人TNF-α基因,構建分泌型抗肝癌單鏈免疫毒素基因,併將該基因剋隆入帶有GFP報告基因的真覈錶達載體,用燐痠鈣共沉澱法轉染人肝癌細胞繫SMMC-7721進行瞬時錶達.結果 DNA序列分析證實在sFv 的5′耑引入正確的60 bp引導肽序列, 酶切鑒定證明成功構建瞭分泌型抗肝癌單鏈免疫毒素融閤GFP真覈錶達載體,併在SMMC-7721細胞中成功地錶達瞭融閤熒光蛋白.結論成功構建併錶達瞭分泌型抗肝癌單鏈免疫毒素融閤GFP基因,為肝癌免疫基因治療的進一步研究奠定瞭基礎.
목적구건분비형항간암단련면역독소진핵표체재체병재인간암세포계SMMC-7721중표체.방법채용PCR방법재항간암sFv 적5′단인입인도서렬사기능구재진핵세포중표체병분비,재기하유련접인TNF-α기인,구건분비형항간암단련면역독소기인,병장해기인극륭입대유GFP보고기인적진핵표체재체,용린산개공침정법전염인간암세포계SMMC-7721진행순시표체.결과 DNA서렬분석증실재sFv 적5′단인입정학적60 bp인도태서렬, 매절감정증명성공구건료분비형항간암단련면역독소융합GFP진핵표체재체,병재SMMC-7721세포중성공지표체료융합형광단백.결론성공구건병표체료분비형항간암단련면역독소융합GFP기인,위간암면역기인치료적진일보연구전정료기출.
