CAJ | 학술논문

目的观察重构型caspase-7的表达对肿瘤细胞的凋亡诱导作用.方法用反转录PCR方法获取野生型人caspase-7基因,用重组PCR构建了两种重构型caspase-7基因,即大、小亚基序列次序颠倒的rev-ca2spase-7以及N-端带有绿脓杆菌外毒素转膜结构域部分肽段的融合蛋白(PEⅡ-rev-caspase-7)的基因.将两种重构型caspase-7基因克隆入表达载体pIRES2-EGFP, 脂质体法转染肿瘤细胞,通过荧光显微镜观察、电镜观察、MTT检测等方法检测重组基因的表达及其对肿瘤细胞的促凋亡活性.结果成功获得了caspase-7基因,构建了rev-caspase-7基因和rev-caspase-7与绿脓杆菌外毒素(PE)转膜肽段的融合蛋白(PEⅡ-rev-caspase-7)基因及其表达载体.将两种重构型caspase-7转染肿瘤细胞后,证实细胞发生凋亡.结论两种重构型caspase-7均可以有效地诱导肿瘤细胞发生凋亡.
목적관찰중구형caspase-7적표체대종류세포적조망유도작용.방법용반전록PCR방법획취야생형인caspase-7기인,용중조PCR구건료량충중구형caspase-7기인,즉대、소아기서렬차서전도적rev-ca2spase-7이급N-단대유록농간균외독소전막결구역부분태단적융합단백(PEⅡ-rev-caspase-7)적기인.장량충중구형caspase-7기인극륭입표체재체pIRES2-EGFP, 지질체법전염종류세포,통과형광현미경관찰、전경관찰、MTT검측등방법검측중조기인적표체급기대종류세포적촉조망활성.결과성공획득료caspase-7기인,구건료rev-caspase-7기인화rev-caspase-7여록농간균외독소(PE)전막태단적융합단백(PEⅡ-rev-caspase-7)기인급기표체재체.장량충중구형caspase-7전염종류세포후,증실세포발생조망.결론량충중구형caspase-7균가이유효지유도종류세포발생조망.