细胞生物学杂志
細胞生物學雜誌
세포생물학잡지
CHINESE JOURNAL OF CELL BIOLOGY
2004年
3期
305-308
,共4页
苗宏生%余路阳%林波%武家才%郭礼和%惠国桢
苗宏生%餘路暘%林波%武傢纔%郭禮和%惠國楨
묘굉생%여로양%림파%무가재%곽례화%혜국정
转染%原代大鼠海马神经元%DOTAP%LipofectamineTM%NucleofectorTM%绿色荧光蛋白
轉染%原代大鼠海馬神經元%DOTAP%LipofectamineTM%NucleofectorTM%綠色熒光蛋白
전염%원대대서해마신경원%DOTAP%LipofectamineTM%NucleofectorTM%록색형광단백
用原代大鼠海马神经元为模型,对新型电转染方法NucleofectorTM与脂质体DOTAP和LipofectaimineTM的转染效率和转染前后细胞存活率进行比较研究,探讨NucleofectorTM的高效性与可靠性.从E18胎鼠海马中取出神经元进行体外培养,并用神经微丝(NF)抗体进行免疫细胞化学染色鉴定细胞类型.分别用DOTAP,LipofectamineTM and NucleofectorTM包裹pCMV-eGFP质粒转染原代大鼠海马神经元.神经元的存活率用流式细胞仪检测.实验结果表明:DOTAP和LipofectamineTM的基因转染效率仅为1.55%和2.45%,而NucleofectorTM的转染效率则超过20%;细胞转染前后的存活率在DOTAP组分别为98.37%和88.35%,LipofectamineTM组分别为98.37%和90.11%,而在NucleofectorTM组中分别为98.37%和51.82%.上述实验数据表明:NucleofectorTM转染技术能高效并安全地转染原代大鼠海马神经元,但死亡率较高.
用原代大鼠海馬神經元為模型,對新型電轉染方法NucleofectorTM與脂質體DOTAP和LipofectaimineTM的轉染效率和轉染前後細胞存活率進行比較研究,探討NucleofectorTM的高效性與可靠性.從E18胎鼠海馬中取齣神經元進行體外培養,併用神經微絲(NF)抗體進行免疫細胞化學染色鑒定細胞類型.分彆用DOTAP,LipofectamineTM and NucleofectorTM包裹pCMV-eGFP質粒轉染原代大鼠海馬神經元.神經元的存活率用流式細胞儀檢測.實驗結果錶明:DOTAP和LipofectamineTM的基因轉染效率僅為1.55%和2.45%,而NucleofectorTM的轉染效率則超過20%;細胞轉染前後的存活率在DOTAP組分彆為98.37%和88.35%,LipofectamineTM組分彆為98.37%和90.11%,而在NucleofectorTM組中分彆為98.37%和51.82%.上述實驗數據錶明:NucleofectorTM轉染技術能高效併安全地轉染原代大鼠海馬神經元,但死亡率較高.
용원대대서해마신경원위모형,대신형전전염방법NucleofectorTM여지질체DOTAP화LipofectaimineTM적전염효솔화전염전후세포존활솔진행비교연구,탐토NucleofectorTM적고효성여가고성.종E18태서해마중취출신경원진행체외배양,병용신경미사(NF)항체진행면역세포화학염색감정세포류형.분별용DOTAP,LipofectamineTM and NucleofectorTM포과pCMV-eGFP질립전염원대대서해마신경원.신경원적존활솔용류식세포의검측.실험결과표명:DOTAP화LipofectamineTM적기인전염효솔부위1.55%화2.45%,이NucleofectorTM적전염효솔칙초과20%;세포전염전후적존활솔재DOTAP조분별위98.37%화88.35%,LipofectamineTM조분별위98.37%화90.11%,이재NucleofectorTM조중분별위98.37%화51.82%.상술실험수거표명:NucleofectorTM전염기술능고효병안전지전염원대대서해마신경원,단사망솔교고.
