目的:探讨大黄素干预对家兔离体血管平滑肌细胞增殖的作用,并观察其浓度效应剂量.方法:实验于2004-06/12在第三军医大学西南医院药学部完成.选择雄性家兔1只作为动脉平滑肌细胞的动物来源,采用组织贴块法进行主动脉平滑肌细胞的培养.细胞培养成功后分2组:对照组和大黄素组.对照组不加药,大黄素组按剂量分为5个亚组即1.25,2.5,5,10,20mg/L组,每组6孔.选用生长良好的第三四代细胞,加3H-标记的胸腺脱氧核苷酸行液闪计数以表征细胞增殖的程度,细胞增殖测定采用酶标仪上比色(波长为570 nm)用吸光度值表示.超过氧化物歧化酶测定采用邻苯三酚自氧化抑制法,直接以每毫升培养液中超过氧化物歧化酶kat表示.脂质过氧化物测定采用改良TBA微量法,以脂质过氧化物的稳定终产物丙二醛浓度(nmol/L)表示.实验结果采用单因素方差分析(方差齐性检验),用SNK法进行均数之间的显著性检验.结果:①大黄素对细胞增殖的影响:随着大黄素剂量的增加,吸光度值逐渐减少,抑制率逐渐增高.大黄素5,10,20mg/L剂量组的吸光度值明显低于对照组(0.594±0.037,0.410±0.014,0.301±0.024,0.730±0.041,P＜0.05).②大黄素对胸腺嘧啶脱氧核苷酸掺人量的影响:随着大黄素剂量的增加,胸腺嘧啶脱氧核苷酸掺人量逐渐减少,抑制率逐渐增高.大黄素5,10,20 mg/L剂量组每分液闪计数值明显低于对照组大黄素(33537±3 713,29 304±4 336,21 155±1 938,73 958±2 276,t=5.862,7.330,18.688,P＜0.05).③大黄素对超过氧化物歧化酶的影响:大黄素剂量1.25,2.5 mg/L剂量组,超过氧化物歧化酶高于对照组,但差异不显著(P＞0.05).5,10,20 mg/L剂量组明显高于对照组[(118.19±3.56),(127.48±4.59),(140.23±4.96),(100.16±9.83)kat/L,t=4.224,6.170,8.914,P＜0.05].④对丙二醛含量变化的影响:随着大黄素剂量的增加,其水平逐渐减少,当大黄素剂量为5,10,20mg/L时与对照组相比显著减低[(2.336±0.113),(1.945±0.135),(1.381±0.193),(3.110±0.256)nmol/L,t=6.774,9.857,13.187,P＜0.05].结论:随着培养液中大黄素浓度的增加,超过氧化物歧化酶活性逐渐增强,同时丙二醛水平逐渐降低,从而抑制血管平滑肌细胞的增殖此,此作用均从5mg/L剂量组开始,并具有浓度依赖性.
目的:探討大黃素榦預對傢兔離體血管平滑肌細胞增殖的作用,併觀察其濃度效應劑量.方法:實驗于2004-06/12在第三軍醫大學西南醫院藥學部完成.選擇雄性傢兔1隻作為動脈平滑肌細胞的動物來源,採用組織貼塊法進行主動脈平滑肌細胞的培養.細胞培養成功後分2組:對照組和大黃素組.對照組不加藥,大黃素組按劑量分為5箇亞組即1.25,2.5,5,10,20mg/L組,每組6孔.選用生長良好的第三四代細胞,加3H-標記的胸腺脫氧覈苷痠行液閃計數以錶徵細胞增殖的程度,細胞增殖測定採用酶標儀上比色(波長為570 nm)用吸光度值錶示.超過氧化物歧化酶測定採用鄰苯三酚自氧化抑製法,直接以每毫升培養液中超過氧化物歧化酶kat錶示.脂質過氧化物測定採用改良TBA微量法,以脂質過氧化物的穩定終產物丙二醛濃度(nmol/L)錶示.實驗結果採用單因素方差分析(方差齊性檢驗),用SNK法進行均數之間的顯著性檢驗.結果:①大黃素對細胞增殖的影響:隨著大黃素劑量的增加,吸光度值逐漸減少,抑製率逐漸增高.大黃素5,10,20mg/L劑量組的吸光度值明顯低于對照組(0.594±0.037,0.410±0.014,0.301±0.024,0.730±0.041,P＜0.05).②大黃素對胸腺嘧啶脫氧覈苷痠摻人量的影響:隨著大黃素劑量的增加,胸腺嘧啶脫氧覈苷痠摻人量逐漸減少,抑製率逐漸增高.大黃素5,10,20 mg/L劑量組每分液閃計數值明顯低于對照組大黃素(33537±3 713,29 304±4 336,21 155±1 938,73 958±2 276,t=5.862,7.330,18.688,P＜0.05).③大黃素對超過氧化物歧化酶的影響:大黃素劑量1.25,2.5 mg/L劑量組,超過氧化物歧化酶高于對照組,但差異不顯著(P＞0.05).5,10,20 mg/L劑量組明顯高于對照組[(118.19±3.56),(127.48±4.59),(140.23±4.96),(100.16±9.83)kat/L,t=4.224,6.170,8.914,P＜0.05].④對丙二醛含量變化的影響:隨著大黃素劑量的增加,其水平逐漸減少,噹大黃素劑量為5,10,20mg/L時與對照組相比顯著減低[(2.336±0.113),(1.945±0.135),(1.381±0.193),(3.110±0.256)nmol/L,t=6.774,9.857,13.187,P＜0.05].結論:隨著培養液中大黃素濃度的增加,超過氧化物歧化酶活性逐漸增彊,同時丙二醛水平逐漸降低,從而抑製血管平滑肌細胞的增殖此,此作用均從5mg/L劑量組開始,併具有濃度依賴性.
목적:탐토대황소간예대가토리체혈관평활기세포증식적작용,병관찰기농도효응제량.방법:실험우2004-06/12재제삼군의대학서남의원약학부완성.선택웅성가토1지작위동맥평활기세포적동물래원,채용조직첩괴법진행주동맥평활기세포적배양.세포배양성공후분2조:대조조화대황소조.대조조불가약,대황소조안제량분위5개아조즉1.25,2.5,5,10,20mg/L조,매조6공.선용생장량호적제삼사대세포,가3H-표기적흉선탈양핵감산행액섬계수이표정세포증식적정도,세포증식측정채용매표의상비색(파장위570 nm)용흡광도치표시.초과양화물기화매측정채용린분삼분자양화억제법,직접이매호승배양액중초과양화물기화매kat표시.지질과양화물측정채용개량TBA미량법,이지질과양화물적은정종산물병이철농도(nmol/L)표시.실험결과채용단인소방차분석(방차제성검험),용SNK법진행균수지간적현저성검험.결과:①대황소대세포증식적영향:수착대황소제량적증가,흡광도치축점감소,억제솔축점증고.대황소5,10,20mg/L제량조적흡광도치명현저우대조조(0.594±0.037,0.410±0.014,0.301±0.024,0.730±0.041,P＜0.05).②대황소대흉선밀정탈양핵감산참인량적영향:수착대황소제량적증가,흉선밀정탈양핵감산참인량축점감소,억제솔축점증고.대황소5,10,20 mg/L제량조매분액섬계수치명현저우대조조대황소(33537±3 713,29 304±4 336,21 155±1 938,73 958±2 276,t=5.862,7.330,18.688,P＜0.05).③대황소대초과양화물기화매적영향:대황소제량1.25,2.5 mg/L제량조,초과양화물기화매고우대조조,단차이불현저(P＞0.05).5,10,20 mg/L제량조명현고우대조조[(118.19±3.56),(127.48±4.59),(140.23±4.96),(100.16±9.83)kat/L,t=4.224,6.170,8.914,P＜0.05].④대병이철함량변화적영향:수착대황소제량적증가,기수평축점감소,당대황소제량위5,10,20mg/L시여대조조상비현저감저[(2.336±0.113),(1.945±0.135),(1.381±0.193),(3.110±0.256)nmol/L,t=6.774,9.857,13.187,P＜0.05].결론:수착배양액중대황소농도적증가,초과양화물기화매활성축점증강,동시병이철수평축점강저,종이억제혈관평활기세포적증식차,차작용균종5mg/L제량조개시,병구유농도의뢰성.
