中国实验血液学杂志
中國實驗血液學雜誌
중국실험혈액학잡지
JOURNAL OF EXPERIMENTAL HEMATOLOGY
2008年
6期
1408-1412
,共5页
王明丽%解志刚%陆寒%施明%胡美茹%于鸣%马远方%沈倍奋%郭宁
王明麗%解誌剛%陸寒%施明%鬍美茹%于鳴%馬遠方%瀋倍奮%郭寧
왕명려%해지강%륙한%시명%호미여%우명%마원방%침배강%곽저
neu-Fc%GM-CSF%卡介苗%免疫调节%IL-10%IL-12
neu-Fc%GM-CSF%卡介苗%免疫調節%IL-10%IL-12
neu-Fc%GM-CSF%잡개묘%면역조절%IL-10%IL-12
本研究探讨异种蛋白neu-Fc协同重组人粒/巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)及卡介苗(BCG)对Th1型和Th2型免疫应答的调节作用.通过基因工程技术将大鼠neu L2-S2功能域与人IgG Fc区编码序列融合,构建真核表达载体.在CHO细胞中获得稳定表达,应用rProtein A Sepharose Fast Flow亲和层析纯化neu-Fc融合蛋白,应用SDS-PAGE和Western blot鉴定重组蛋白.Ficoll法分离人外周血单个核细胞(PBMNC),MTT法检测融合蛋白对PBMNC的促增殖作用.通过ELISA法检测IL-12和IL-10水平的变化.结果表明:PBMNC经MCF-7细胞上清诱导后,IL-12水平降低(P＜0.05),IL-10水平显著升高(P＜0.01).10 nmol/L neu-Fc对PBMNC具有显著的促增殖作用.与GM-CSF、BCG或者neu-Fc单独作用相比,neu-Fc与GM-CSF、BCG联合作用可显著上调IL-12表达,下调IL-10表达(P＜0.01).结论:neu-Fc具有很好的促增殖作用,GM-CSF和BCG协同neu-Fc能有效诱导Th1型细胞应答.
本研究探討異種蛋白neu-Fc協同重組人粒/巨噬細胞集落刺激因子(GM-CSF)及卡介苗(BCG)對Th1型和Th2型免疫應答的調節作用.通過基因工程技術將大鼠neu L2-S2功能域與人IgG Fc區編碼序列融閤,構建真覈錶達載體.在CHO細胞中穫得穩定錶達,應用rProtein A Sepharose Fast Flow親和層析純化neu-Fc融閤蛋白,應用SDS-PAGE和Western blot鑒定重組蛋白.Ficoll法分離人外週血單箇覈細胞(PBMNC),MTT法檢測融閤蛋白對PBMNC的促增殖作用.通過ELISA法檢測IL-12和IL-10水平的變化.結果錶明:PBMNC經MCF-7細胞上清誘導後,IL-12水平降低(P＜0.05),IL-10水平顯著升高(P＜0.01).10 nmol/L neu-Fc對PBMNC具有顯著的促增殖作用.與GM-CSF、BCG或者neu-Fc單獨作用相比,neu-Fc與GM-CSF、BCG聯閤作用可顯著上調IL-12錶達,下調IL-10錶達(P＜0.01).結論:neu-Fc具有很好的促增殖作用,GM-CSF和BCG協同neu-Fc能有效誘導Th1型細胞應答.
본연구탐토이충단백neu-Fc협동중조인립/거서세포집락자격인자(GM-CSF)급잡개묘(BCG)대Th1형화Th2형면역응답적조절작용.통과기인공정기술장대서neu L2-S2공능역여인IgG Fc구편마서렬융합,구건진핵표체재체.재CHO세포중획득은정표체,응용rProtein A Sepharose Fast Flow친화층석순화neu-Fc융합단백,응용SDS-PAGE화Western blot감정중조단백.Ficoll법분리인외주혈단개핵세포(PBMNC),MTT법검측융합단백대PBMNC적촉증식작용.통과ELISA법검측IL-12화IL-10수평적변화.결과표명:PBMNC경MCF-7세포상청유도후,IL-12수평강저(P＜0.05),IL-10수평현저승고(P＜0.01).10 nmol/L neu-Fc대PBMNC구유현저적촉증식작용.여GM-CSF、BCG혹자neu-Fc단독작용상비,neu-Fc여GM-CSF、BCG연합작용가현저상조IL-12표체,하조IL-10표체(P＜0.01).결론:neu-Fc구유흔호적촉증식작용,GM-CSF화BCG협동neu-Fc능유효유도Th1형세포응답.
