食品科学
食品科學
식품과학
FOOD SCIENCE
2010年
12期
16-20
,共5页
杨先乐%黄宣运%胡鲲%方伟%王炼%姜有声
楊先樂%黃宣運%鬍鯤%方偉%王煉%薑有聲
양선악%황선운%호곤%방위%왕련%강유성
环丙沙星%半抗原%抗体%免疫
環丙沙星%半抗原%抗體%免疫
배병사성%반항원%항체%면역
通过改进的碳二亚胺法制备环丙沙星-牛血清白蛋白偶联物(CIP-BSA),用紫外扫描、十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)方法鉴定偶联物.利用制备的CIP-BSA偶联物作为免疫原,免疫Balb/c小鼠,用杂交瘤技术制备环内沙星单克隆抗体,并对其效价、亲和力和特异性进行鉴定.结果表明:CIP-BSA的偶联比为30:1.经间接酶联免疫吸附(ELISA)法筛选,共筛出两株敏感、特异的杂交瘤细胞(JY-1、JY-2).这两株细胞的腹水经纯化后的抗体效价分别为5.12×106、2.56×106,亲和力常数分别为2.88×109、2.46×109L/mol,两抗体均为IgG1a,取亲和力高的JY-1进行竞争抑制测定,IC50值可以达到9.83ng/mL.该单抗仅与恩诺沙星存在交叉反应,交叉反应率为95%.通过验证得到的JY-1细胞株分泌的单克隆抗体可用于水产品中环丙沙星残留的快速检测.
通過改進的碳二亞胺法製備環丙沙星-牛血清白蛋白偶聯物(CIP-BSA),用紫外掃描、十二烷基磺痠鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)方法鑒定偶聯物.利用製備的CIP-BSA偶聯物作為免疫原,免疫Balb/c小鼠,用雜交瘤技術製備環內沙星單剋隆抗體,併對其效價、親和力和特異性進行鑒定.結果錶明:CIP-BSA的偶聯比為30:1.經間接酶聯免疫吸附(ELISA)法篩選,共篩齣兩株敏感、特異的雜交瘤細胞(JY-1、JY-2).這兩株細胞的腹水經純化後的抗體效價分彆為5.12×106、2.56×106,親和力常數分彆為2.88×109、2.46×109L/mol,兩抗體均為IgG1a,取親和力高的JY-1進行競爭抑製測定,IC50值可以達到9.83ng/mL.該單抗僅與恩諾沙星存在交扠反應,交扠反應率為95%.通過驗證得到的JY-1細胞株分泌的單剋隆抗體可用于水產品中環丙沙星殘留的快速檢測.
통과개진적탄이아알법제비배병사성-우혈청백단백우련물(CIP-BSA),용자외소묘、십이완기광산납-취병희선알응효전영(SDS-PAGE)방법감정우련물.이용제비적CIP-BSA우련물작위면역원,면역Balb/c소서,용잡교류기술제비배내사성단극륭항체,병대기효개、친화력화특이성진행감정.결과표명:CIP-BSA적우련비위30:1.경간접매련면역흡부(ELISA)법사선,공사출량주민감、특이적잡교류세포(JY-1、JY-2).저량주세포적복수경순화후적항체효개분별위5.12×106、2.56×106,친화력상수분별위2.88×109、2.46×109L/mol,량항체균위IgG1a,취친화력고적JY-1진행경쟁억제측정,IC50치가이체도9.83ng/mL.해단항부여은낙사성존재교차반응,교차반응솔위95%.통과험증득도적JY-1세포주분비적단극륭항체가용우수산품중배병사성잔류적쾌속검측.
