CAJ | 학술논문

目的:从基因和蛋白水平探讨冬虫夏草菌粉提取液调节哮喘缓解期儿童体内T辅助淋巴细胞(T helper lymphocyte, Th)失衡及减轻炎症反应的机制,为冬虫夏草应用于哮喘缓解期提供理论依据.方法:采集20例哮喘缓解期儿童外周血3 mL,用Ficoll法分离出外周血单核细胞(peripheral blood mononuclear cell, PBMC).每份血样分为空白组,低、高剂量冬虫夏草菌粉提取液(10、20 μg/mL)组.细胞培养箱中37 ℃、5% CO2培养48 h后,利用实时荧光定量聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)法检测PBMC γ干扰素(interferon-γ, IFN-γ)、白细胞介素4(interleukin-4,IL-4)、IL-10、T细胞表达的T盒(T-box expressed in T cells, T-bet)、GATA连接蛋白3(GATA-binding protein-3, GATA-3)、叉头状转录因子3(forkhead/winged-helix transcription factor-3, Foxp3) mRNA的表达,利用酶联免疫吸附测定法检测细胞培养上清液中IFN-γ、IL-4及IL-10含量.结果:3组PBMC IFN-γ mRNA的表达比较,差异无统计学意义;高剂量和低剂量冬虫夏草菌粉提取液组IL-4 mRNA的表达明显低于空白组(P=0.014,P=0.011);高剂量冬虫夏草菌粉提取液组IL-10 mRNA的表达高于空白组(P=0.034);3组IFN-γ mRNA/IL-4 mRNA比值比较,差异无统计学意义.高剂量冬虫夏草菌粉提取液组细胞培养上清中IL-4含量低于空白组(P=0.018),IL-10含量及IFN-γ/IL-4比值均高于空白组(P=0.011,P=0.045);3组IFN-γ含量比较,差异无统计学意义.高剂量和低剂量冬虫夏草菌粉提取液组PBMC T-bet/GATA-3比值及Foxp3 mRNA的表达均高于空白组(P=0.001,P=0.015);高剂量冬虫夏草菌粉提取液组GATA-3 mRNA的表达明显低于空白组(P=0.028);3组T-bet mRNA的表达比较差异无统计学意义.结论:冬虫夏草菌粉提取液可下调PBMC中GATA-3 mRNA的表达和上调Foxp3 mRNA的表达,增加IL-10的含量,以此减轻炎症反应.
목적:종기인화단백수평탐토동충하초균분제취액조절효천완해기인동체내T보조림파세포(T helper lymphocyte, Th)실형급감경염증반응적궤제,위동충하초응용우효천완해기제공이론의거.방법:채집20례효천완해기인동외주혈3 mL,용Ficoll법분리출외주혈단핵세포(peripheral blood mononuclear cell, PBMC).매빈혈양분위공백조,저、고제량동충하초균분제취액(10、20 μg/mL)조.세포배양상중37 ℃、5% CO2배양48 h후,이용실시형광정량취합매련식반응(polymerase chain reaction,PCR)법검측PBMC γ간우소(interferon-γ, IFN-γ)、백세포개소4(interleukin-4,IL-4)、IL-10、T세포표체적T합(T-box expressed in T cells, T-bet)、GATA련접단백3(GATA-binding protein-3, GATA-3)、차두상전록인자3(forkhead/winged-helix transcription factor-3, Foxp3) mRNA적표체,이용매련면역흡부측정법검측세포배양상청액중IFN-γ、IL-4급IL-10함량.결과:3조PBMC IFN-γ mRNA적표체비교,차이무통계학의의;고제량화저제량동충하초균분제취액조IL-4 mRNA적표체명현저우공백조(P=0.014,P=0.011);고제량동충하초균분제취액조IL-10 mRNA적표체고우공백조(P=0.034);3조IFN-γ mRNA/IL-4 mRNA비치비교,차이무통계학의의.고제량동충하초균분제취액조세포배양상청중IL-4함량저우공백조(P=0.018),IL-10함량급IFN-γ/IL-4비치균고우공백조(P=0.011,P=0.045);3조IFN-γ함량비교,차이무통계학의의.고제량화저제량동충하초균분제취액조PBMC T-bet/GATA-3비치급Foxp3 mRNA적표체균고우공백조(P=0.001,P=0.015);고제량동충하초균분제취액조GATA-3 mRNA적표체명현저우공백조(P=0.028);3조T-bet mRNA적표체비교차이무통계학의의.결론:동충하초균분제취액가하조PBMC중GATA-3 mRNA적표체화상조Foxp3 mRNA적표체,증가IL-10적함량,이차감경염증반응.