生物技术通讯
生物技術通訊
생물기술통신
LETTERS IN BIOTECHNOLOGY
2012年
4期
523-526
,共4页
泛素连接酶%表达%酶活性测定%LNX1%Kv1.4
汎素連接酶%錶達%酶活性測定%LNX1%Kv1.4
범소련접매%표체%매활성측정%LNX1%Kv1.4
目的:在大肠杆菌中表达重组人泛素连接酶LNX1,并研究其对钾离子通道蛋白Kv 1.4的泛素化作用.方法:构建人LNX1重组蛋白原核表达载体pGEX-LNX1,在大肠杆菌中通过IPTG诱导表达重组蛋白,表达产物经GSTrap FF纯化,并通过体外泛素化(in vitro ubiquitination)方法测定其泛素连接酶活性,同样用体外泛素化方法研究其对含有Kv1.4的C端的人工底物的泛素化.结果:获得了纯化的有泛素连接酶活性的重组人LNX1蛋白,重组LNX1可以在体外泛素化体系中泛素化含有Kv1.4的C端的人工底物.结论:重组人LNX1原核表达成功,具有泛素连接酶活性,并催化Kv1.4的泛素化.
目的:在大腸桿菌中錶達重組人汎素連接酶LNX1,併研究其對鉀離子通道蛋白Kv 1.4的汎素化作用.方法:構建人LNX1重組蛋白原覈錶達載體pGEX-LNX1,在大腸桿菌中通過IPTG誘導錶達重組蛋白,錶達產物經GSTrap FF純化,併通過體外汎素化(in vitro ubiquitination)方法測定其汎素連接酶活性,同樣用體外汎素化方法研究其對含有Kv1.4的C耑的人工底物的汎素化.結果:穫得瞭純化的有汎素連接酶活性的重組人LNX1蛋白,重組LNX1可以在體外汎素化體繫中汎素化含有Kv1.4的C耑的人工底物.結論:重組人LNX1原覈錶達成功,具有汎素連接酶活性,併催化Kv1.4的汎素化.
목적:재대장간균중표체중조인범소련접매LNX1,병연구기대갑리자통도단백Kv 1.4적범소화작용.방법:구건인LNX1중조단백원핵표체재체pGEX-LNX1,재대장간균중통과IPTG유도표체중조단백,표체산물경GSTrap FF순화,병통과체외범소화(in vitro ubiquitination)방법측정기범소련접매활성,동양용체외범소화방법연구기대함유Kv1.4적C단적인공저물적범소화.결과:획득료순화적유범소련접매활성적중조인LNX1단백,중조LNX1가이재체외범소화체계중범소화함유Kv1.4적C단적인공저물.결론:중조인LNX1원핵표체성공,구유범소련접매활성,병최화Kv1.4적범소화.
