上海交通大学学报（医学版）
上海交通大學學報（醫學版）
상해교통대학학보（의학판）
JOURNAL OF SHANGHAI JIAOTONG UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCE)
2012年
6期
736-740
,共5页
CD133%肿瘤干细胞%上皮间质转变%肺癌
CD133%腫瘤榦細胞%上皮間質轉變%肺癌
CD133%종류간세포%상피간질전변%폐암
目的 分离CD133+A549细胞并对其肿瘤干细胞和上皮间质转变(EMT)特性进行初步研究.方法 采用免疫磁珠法分离并鉴定A549细胞,Real-Time PCR法和Western blotting法鉴定分离的细胞.Real-Time PCR法测定CD133+ A549和CD133-A549细胞中肿瘤干细胞标志物(CXCR4、Oct4、CD44、Bmi1、EpCam)和EMT标志物(E-Cadherin和Zeb1)mRNA的表达.分选后的CD133+A549和CD133-A549细胞经不同浓度(0、0.25、0.5、1.0μg/mL)阿霉素处理72 h,采用细胞增殖实验检测细胞的相对存活率.结果 经CD133微小磁珠分离后、成功获得CD133+ A549和CD133-A549细胞,CD133+ A549细胞的CD133表达明显高于CD133-A549细胞.Real-Time PCR检测结果显示,CD133+ A549细胞中Oct4、CD44、Bmi1、EpCam mRNA的相对表达量均显著高于CD133 - A549细胞[(1±0.16)vs(0.66±0.12)、(1±0.07)vs(0.48±0.04)、(1±0.03)vs(0.49±0.06)以及(1±0.14)vs(0.38 ±0.12)(P＜0.05)],但CXCR4 mRNA的相对表达量比较差异无统计学意义[(1±0.13)vs(0.73±0.14),P＞0.05]; CD133+A549细胞中Zeb1 mRNA的相对表达量显著高于CD133- A549细胞[(1 ±0.09)vs(0.39±0.05),P＜0.05],但E-Cadherin mRNA的相对表达量显著低于CD133-A549细胞[(1±0.02)vs(4.98±0.04),P＜0.05].细胞增殖实验结果显示,采用0.5和1.0μg/mL阿霉素处理后,CD133+ A549细胞的相对存活率均显著高于CD133-A549细胞,差异有统计学意义[(85±9.4)％vs(67±13.1)％,P＜0.05;(80±14.9)％vs(56±6.3)％,P＜0.01].结论 采用免疫磁珠分离法可成功分离CD133+A549和CD133-A549细胞；CD133+ A549细胞中有其他肿瘤干细胞标志物的表达,并表现出EMT特性.CD133可能是肺癌肿瘤于细胞和EMT特征的标志物.
目的 分離CD133+A549細胞併對其腫瘤榦細胞和上皮間質轉變(EMT)特性進行初步研究.方法 採用免疫磁珠法分離併鑒定A549細胞,Real-Time PCR法和Western blotting法鑒定分離的細胞.Real-Time PCR法測定CD133+ A549和CD133-A549細胞中腫瘤榦細胞標誌物(CXCR4、Oct4、CD44、Bmi1、EpCam)和EMT標誌物(E-Cadherin和Zeb1)mRNA的錶達.分選後的CD133+A549和CD133-A549細胞經不同濃度(0、0.25、0.5、1.0μg/mL)阿黴素處理72 h,採用細胞增殖實驗檢測細胞的相對存活率.結果 經CD133微小磁珠分離後、成功穫得CD133+ A549和CD133-A549細胞,CD133+ A549細胞的CD133錶達明顯高于CD133-A549細胞.Real-Time PCR檢測結果顯示,CD133+ A549細胞中Oct4、CD44、Bmi1、EpCam mRNA的相對錶達量均顯著高于CD133 - A549細胞[(1±0.16)vs(0.66±0.12)、(1±0.07)vs(0.48±0.04)、(1±0.03)vs(0.49±0.06)以及(1±0.14)vs(0.38 ±0.12)(P＜0.05)],但CXCR4 mRNA的相對錶達量比較差異無統計學意義[(1±0.13)vs(0.73±0.14),P＞0.05]; CD133+A549細胞中Zeb1 mRNA的相對錶達量顯著高于CD133- A549細胞[(1 ±0.09)vs(0.39±0.05),P＜0.05],但E-Cadherin mRNA的相對錶達量顯著低于CD133-A549細胞[(1±0.02)vs(4.98±0.04),P＜0.05].細胞增殖實驗結果顯示,採用0.5和1.0μg/mL阿黴素處理後,CD133+ A549細胞的相對存活率均顯著高于CD133-A549細胞,差異有統計學意義[(85±9.4)％vs(67±13.1)％,P＜0.05;(80±14.9)％vs(56±6.3)％,P＜0.01].結論 採用免疫磁珠分離法可成功分離CD133+A549和CD133-A549細胞；CD133+ A549細胞中有其他腫瘤榦細胞標誌物的錶達,併錶現齣EMT特性.CD133可能是肺癌腫瘤于細胞和EMT特徵的標誌物.
목적 분리CD133+A549세포병대기종류간세포화상피간질전변(EMT)특성진행초보연구.방법 채용면역자주법분리병감정A549세포,Real-Time PCR법화Western blotting법감정분리적세포.Real-Time PCR법측정CD133+ A549화CD133-A549세포중종류간세포표지물(CXCR4、Oct4、CD44、Bmi1、EpCam)화EMT표지물(E-Cadherin화Zeb1)mRNA적표체.분선후적CD133+A549화CD133-A549세포경불동농도(0、0.25、0.5、1.0μg/mL)아매소처리72 h,채용세포증식실험검측세포적상대존활솔.결과 경CD133미소자주분리후、성공획득CD133+ A549화CD133-A549세포,CD133+ A549세포적CD133표체명현고우CD133-A549세포.Real-Time PCR검측결과현시,CD133+ A549세포중Oct4、CD44、Bmi1、EpCam mRNA적상대표체량균현저고우CD133 - A549세포[(1±0.16)vs(0.66±0.12)、(1±0.07)vs(0.48±0.04)、(1±0.03)vs(0.49±0.06)이급(1±0.14)vs(0.38 ±0.12)(P＜0.05)],단CXCR4 mRNA적상대표체량비교차이무통계학의의[(1±0.13)vs(0.73±0.14),P＞0.05]; CD133+A549세포중Zeb1 mRNA적상대표체량현저고우CD133- A549세포[(1 ±0.09)vs(0.39±0.05),P＜0.05],단E-Cadherin mRNA적상대표체량현저저우CD133-A549세포[(1±0.02)vs(4.98±0.04),P＜0.05].세포증식실험결과현시,채용0.5화1.0μg/mL아매소처리후,CD133+ A549세포적상대존활솔균현저고우CD133-A549세포,차이유통계학의의[(85±9.4)％vs(67±13.1)％,P＜0.05;(80±14.9)％vs(56±6.3)％,P＜0.01].결론 채용면역자주분리법가성공분리CD133+A549화CD133-A549세포；CD133+ A549세포중유기타종류간세포표지물적표체,병표현출EMT특성.CD133가능시폐암종류우세포화EMT특정적표지물.
