国际呼吸杂志
國際呼吸雜誌
국제호흡잡지
INTERNATIONAL JOURNAL OF RESPIRATION
2012年
7期
517-521
,共5页
香烟烟雾提取物%肺泡上皮细胞Ⅱ型%热休克蛋白27%γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶
香煙煙霧提取物%肺泡上皮細胞Ⅱ型%熱休剋蛋白27%γ-穀氨酰半胱氨痠閤成酶
향연연무제취물%폐포상피세포Ⅱ형%열휴극단백27%γ-곡안선반광안산합성매
Cigarette smoke extract%Alveolar epithelial cell%Heat shock protein 27%Gammaglutamyl cysteine syntase
目的 探讨香烟烟雾提取物(cigarette smoke extract,CSE)对肺泡Ⅱ型上皮细胞热休克蛋白27(heat shock protein 27,HSP27)及γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(gamma glutamyl cysteine syntase,γ-GCS)表达的影响.方法 体外培养肺泡Ⅱ细胞(A549),加入5％浓度的CSE作用于细胞0、6、12、24、48h以及不同浓度的CSE(0％,2.5％,5％,10％)作用细胞24 h,运用逆转录聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)检测γ-GCS mRNA含量的变化;不同浓度的CSE(0％,2.5％,5％,10％)作用细胞12、24 h以及5％的CSE作用细胞0、6、12、24、48 h,采用免疫蛋白印迹(western bloting,WB)检测γ-GCS、HSP27及其磷酸化HSP27(p-HSP27)在蛋白表达水平的变化.结果 ①5％CSE的作用下,随着干预时间的延长,γ-GCS mRNA含量呈明显增加趋势(P＜0.05);②不同浓度的CSE作用细胞24 h,随着浓度的增加,γ-GCS mRNA含量呈明显增加趋势(P＜0.05);③不同浓度的CSE(0％,2.5％,5％,10％)作用细胞12、24 h以及5％的CSE作用细胞0、6、12、24、48 h,HSP27及p-HSP27的蛋白水平有明显上调趋势(P＜0.05),γ-GCS蛋白含量也呈浓度和时间依赖上升.结论 CSE能够引起肺泡上皮细胞应激反应,通过上调HSP27磷酸化及表达γ-GCS对肺泡上皮细胞具有保护作用机制.CSE可通过上调HSP27的磷酸化及γ-GCS的表达启动肺泡上皮细胞的应激反应,以保护细胞.
目的 探討香煙煙霧提取物(cigarette smoke extract,CSE)對肺泡Ⅱ型上皮細胞熱休剋蛋白27(heat shock protein 27,HSP27)及γ-穀氨酰半胱氨痠閤成酶(gamma glutamyl cysteine syntase,γ-GCS)錶達的影響.方法 體外培養肺泡Ⅱ細胞(A549),加入5％濃度的CSE作用于細胞0、6、12、24、48h以及不同濃度的CSE(0％,2.5％,5％,10％)作用細胞24 h,運用逆轉錄聚閤酶鏈反應(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)檢測γ-GCS mRNA含量的變化;不同濃度的CSE(0％,2.5％,5％,10％)作用細胞12、24 h以及5％的CSE作用細胞0、6、12、24、48 h,採用免疫蛋白印跡(western bloting,WB)檢測γ-GCS、HSP27及其燐痠化HSP27(p-HSP27)在蛋白錶達水平的變化.結果 ①5％CSE的作用下,隨著榦預時間的延長,γ-GCS mRNA含量呈明顯增加趨勢(P＜0.05);②不同濃度的CSE作用細胞24 h,隨著濃度的增加,γ-GCS mRNA含量呈明顯增加趨勢(P＜0.05);③不同濃度的CSE(0％,2.5％,5％,10％)作用細胞12、24 h以及5％的CSE作用細胞0、6、12、24、48 h,HSP27及p-HSP27的蛋白水平有明顯上調趨勢(P＜0.05),γ-GCS蛋白含量也呈濃度和時間依賴上升.結論 CSE能夠引起肺泡上皮細胞應激反應,通過上調HSP27燐痠化及錶達γ-GCS對肺泡上皮細胞具有保護作用機製.CSE可通過上調HSP27的燐痠化及γ-GCS的錶達啟動肺泡上皮細胞的應激反應,以保護細胞.
목적 탐토향연연무제취물(cigarette smoke extract,CSE)대폐포Ⅱ형상피세포열휴극단백27(heat shock protein 27,HSP27)급γ-곡안선반광안산합성매(gamma glutamyl cysteine syntase,γ-GCS)표체적영향.방법 체외배양폐포Ⅱ세포(A549),가입5％농도적CSE작용우세포0、6、12、24、48h이급불동농도적CSE(0％,2.5％,5％,10％)작용세포24 h,운용역전록취합매련반응(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)검측γ-GCS mRNA함량적변화;불동농도적CSE(0％,2.5％,5％,10％)작용세포12、24 h이급5％적CSE작용세포0、6、12、24、48 h,채용면역단백인적(western bloting,WB)검측γ-GCS、HSP27급기린산화HSP27(p-HSP27)재단백표체수평적변화.결과 ①5％CSE적작용하,수착간예시간적연장,γ-GCS mRNA함량정명현증가추세(P＜0.05);②불동농도적CSE작용세포24 h,수착농도적증가,γ-GCS mRNA함량정명현증가추세(P＜0.05);③불동농도적CSE(0％,2.5％,5％,10％)작용세포12、24 h이급5％적CSE작용세포0、6、12、24、48 h,HSP27급p-HSP27적단백수평유명현상조추세(P＜0.05),γ-GCS단백함량야정농도화시간의뢰상승.결론 CSE능구인기폐포상피세포응격반응,통과상조HSP27린산화급표체γ-GCS대폐포상피세포구유보호작용궤제.CSE가통과상조HSP27적린산화급γ-GCS적표체계동폐포상피세포적응격반응,이보호세포.
Objective To investigate the effects of cigarette smoke extract (CSE) on heat shock protein 27 (HSP27) and γ-GCS expression in the cultured A549s that are rat alveolar type Ⅱ cells lines.Methods RT-PCR were used to analyze the changes of γ-GCS mRNA in different time (0,6,12,24,48 h)exposure 5％ concentration of CSE,and different concentrations of CSE (0％,2.5％,5％,10％) in 24 h.Western bloting was performed to detect the level of γ-GCS,HSP27 and the phosphorylation of HSP27 protein expression exposure to different concentrations of CSE in 12,24 h and 5％ concentration of CSE effect on the cells in different time(0,6,12,24,48 h).Results ①With the elongation of drug interference,the expression of γ-GCS mRNA elevated on 5％ concentration of CSE (P＜0.05).The expression of γ-GCS mRNA was significantly increased with the increase of concentration in 24 h (P＜0.05).②Different concentrations of CSE in 12,24 h and 5％ concentration of CSE effect on the cells indifferent time was significantly up-regulated the expression of HSP27 and its phosphorylation,the expression of γ-GCS protein also increased accompaning by the the elongation of concentration and time.Conclusions CSE can start stress responses of alveolar type Ⅱ cells protect by up regulated phosphorylation of HSP27 and γ-GCS expression,which futher to protect the cells.
