新疆农业大学学报
新疆農業大學學報
신강농업대학학보
JOURNAL OF XINJIANG AGRICULTURAL UNIVERSITY
2004年
2期
8-11
,共4页
罗淑萍%张智俊%许键%喻梅辉
囉淑萍%張智俊%許鍵%喻梅輝
라숙평%장지준%허건%유매휘
苦豆子%cDNA文库%PCR
苦豆子%cDNA文庫%PCR
고두자%cDNA문고%PCR
以产于新疆豆科碟形花亚科槐属植物苦豆子(Sophora alopecuroides.L)幼苗为材料,用改进的一步抽提法提取了总RNA,再以生物素标记的Oligo(dT)为引物,经过磁性球珠法,分离出mRNA,反转录酶催化合成cDNA.与EcoRI Adaptor连接,再经Septacryl S-400分级,磷酸化后将双链cDNA克隆于λgt11载体中,经体外包装和感染Y1090菌株,成功构建了效价为0.9×106 pfu·ml-1苦豆子幼苗cDNA文库.随机挑选5个重组噬斑,PCR法检查出重组克隆的插入片段平均大于1 000 bp,说明cDNA文库质量较高.
以產于新疆豆科碟形花亞科槐屬植物苦豆子(Sophora alopecuroides.L)幼苗為材料,用改進的一步抽提法提取瞭總RNA,再以生物素標記的Oligo(dT)為引物,經過磁性毬珠法,分離齣mRNA,反轉錄酶催化閤成cDNA.與EcoRI Adaptor連接,再經Septacryl S-400分級,燐痠化後將雙鏈cDNA剋隆于λgt11載體中,經體外包裝和感染Y1090菌株,成功構建瞭效價為0.9×106 pfu·ml-1苦豆子幼苗cDNA文庫.隨機挑選5箇重組噬斑,PCR法檢查齣重組剋隆的插入片段平均大于1 000 bp,說明cDNA文庫質量較高.
이산우신강두과설형화아과괴속식물고두자(Sophora alopecuroides.L)유묘위재료,용개진적일보추제법제취료총RNA,재이생물소표기적Oligo(dT)위인물,경과자성구주법,분리출mRNA,반전록매최화합성cDNA.여EcoRI Adaptor련접,재경Septacryl S-400분급,린산화후장쌍련cDNA극륭우λgt11재체중,경체외포장화감염Y1090균주,성공구건료효개위0.9×106 pfu·ml-1고두자유묘cDNA문고.수궤도선5개중조서반,PCR법검사출중조극륭적삽입편단평균대우1 000 bp,설명cDNA문고질량교고.
