中国寄生虫学与寄生虫病杂志
中國寄生蟲學與寄生蟲病雜誌
중국기생충학여기생충병잡지
CHINESE JOURNAL OF PARASITOLOGY AND PARASITIC DISEASES
2006年
4期
285-289
,共5页
骆学农%郑亚东%窦永喜%侯俊琳%景志忠%才学鹏
駱學農%鄭亞東%竇永喜%侯俊琳%景誌忠%纔學鵬
락학농%정아동%두영희%후준림%경지충%재학붕
猪带绦虫%TSO45W-4BX%CD58%联合表达
豬帶縚蟲%TSO45W-4BX%CD58%聯閤錶達
저대조충%TSO45W-4BX%CD58%연합표체
目的 以猪CD58为分子佐剂,将CD58基因与猪带绦虫疫苗候选抗原基因TSO45W-4BX联合表达,寻找新型抗猪囊尾蚴疫苗.方法 分别以重组质粒pGEM-4B和pGEM-CD58为模板,PCR扩增猪带绦虫TSO45W-4BX基因和猪CD58基因,将TSO45W-4BX与酶切处理的pGEX-4T-1定向连接,转化大肠埃希菌JM109,重组质粒经鉴定正确后,在其下游酶切插入CD58基因,PCR扩增和测序证明阅读框正确后,用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE))和蛋白质印迹法(Western blotting)分析表达产物的免疫活性.结果 pGEX-4BX和pGEX-4BX/CD58分别表达Mr 41 000和Mr 69 000的融合蛋白,pGEX-4BX表达产物主要以可溶性形式存在,而pGEX-4BX/CD58却以包涵体形式存在,但两者都能被囊尾蚴病患者血清识别.结论 TSO45W-4BX与CD58基因联合表达,TSO45W-4BX仍具有免疫活性.
目的 以豬CD58為分子佐劑,將CD58基因與豬帶縚蟲疫苗候選抗原基因TSO45W-4BX聯閤錶達,尋找新型抗豬囊尾蚴疫苗.方法 分彆以重組質粒pGEM-4B和pGEM-CD58為模闆,PCR擴增豬帶縚蟲TSO45W-4BX基因和豬CD58基因,將TSO45W-4BX與酶切處理的pGEX-4T-1定嚮連接,轉化大腸埃希菌JM109,重組質粒經鑒定正確後,在其下遊酶切插入CD58基因,PCR擴增和測序證明閱讀框正確後,用異丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)誘導錶達,用十二烷基磺痠鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE))和蛋白質印跡法(Western blotting)分析錶達產物的免疫活性.結果 pGEX-4BX和pGEX-4BX/CD58分彆錶達Mr 41 000和Mr 69 000的融閤蛋白,pGEX-4BX錶達產物主要以可溶性形式存在,而pGEX-4BX/CD58卻以包涵體形式存在,但兩者都能被囊尾蚴病患者血清識彆.結論 TSO45W-4BX與CD58基因聯閤錶達,TSO45W-4BX仍具有免疫活性.
목적 이저CD58위분자좌제,장CD58기인여저대조충역묘후선항원기인TSO45W-4BX연합표체,심조신형항저낭미유역묘.방법 분별이중조질립pGEM-4B화pGEM-CD58위모판,PCR확증저대조충TSO45W-4BX기인화저CD58기인,장TSO45W-4BX여매절처리적pGEX-4T-1정향련접,전화대장애희균JM109,중조질립경감정정학후,재기하유매절삽입CD58기인,PCR확증화측서증명열독광정학후,용이병기-β-D-류대반유당감(IPTG)유도표체,용십이완기광산납-취병희선알응효전영(SDS-PAGE))화단백질인적법(Western blotting)분석표체산물적면역활성.결과 pGEX-4BX화pGEX-4BX/CD58분별표체Mr 41 000화Mr 69 000적융합단백,pGEX-4BX표체산물주요이가용성형식존재,이pGEX-4BX/CD58각이포함체형식존재,단량자도능피낭미유병환자혈청식별.결론 TSO45W-4BX여CD58기인연합표체,TSO45W-4BX잉구유면역활성.
