中国预防兽医学报
中國預防獸醫學報
중국예방수의학보
CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
2008年
4期
260-262,299
,共4页
王玉玲%侯艳梅%孙明%陈西钊%赵德明
王玉玲%侯豔梅%孫明%陳西釗%趙德明
왕옥령%후염매%손명%진서쇠%조덕명
马巴贝斯虫%Be82/236-381基因%克隆%表达
馬巴貝斯蟲%Be82/236-381基因%剋隆%錶達
마파패사충%Be82/236-381기인%극륭%표체
本实验在人工合成马巴贝斯虫Be82/236-381 A基因的基础上,通过PCR扩增、酶切、串联的连接方法构建了3个Be82/236-381基因截短片段,并连接克隆于pGEX-4T-1中进行了重组蛋白表达.经PCR鉴定,3个重组表达的Be82/236-381基因截短片段的大小分别为192 bp、306 bp和420 bp,与国外发表的基因序列进行比对,其核苷酸的同源性分别为100%、97.3%和96.6%.经SDS-PAGE电泳鉴定,3种融合表达蛋白分子量分另q为33 ku、37 ku和42 ku.经ELISA检测,3种融合表达的蛋白均能与马巴贝斯虫阳性血清发生特异性反应.
本實驗在人工閤成馬巴貝斯蟲Be82/236-381 A基因的基礎上,通過PCR擴增、酶切、串聯的連接方法構建瞭3箇Be82/236-381基因截短片段,併連接剋隆于pGEX-4T-1中進行瞭重組蛋白錶達.經PCR鑒定,3箇重組錶達的Be82/236-381基因截短片段的大小分彆為192 bp、306 bp和420 bp,與國外髮錶的基因序列進行比對,其覈苷痠的同源性分彆為100%、97.3%和96.6%.經SDS-PAGE電泳鑒定,3種融閤錶達蛋白分子量分另q為33 ku、37 ku和42 ku.經ELISA檢測,3種融閤錶達的蛋白均能與馬巴貝斯蟲暘性血清髮生特異性反應.
본실험재인공합성마파패사충Be82/236-381 A기인적기출상,통과PCR확증、매절、천련적련접방법구건료3개Be82/236-381기인절단편단,병련접극륭우pGEX-4T-1중진행료중조단백표체.경PCR감정,3개중조표체적Be82/236-381기인절단편단적대소분별위192 bp、306 bp화420 bp,여국외발표적기인서렬진행비대,기핵감산적동원성분별위100%、97.3%화96.6%.경SDS-PAGE전영감정,3충융합표체단백분자량분령q위33 ku、37 ku화42 ku.경ELISA검측,3충융합표체적단백균능여마파패사충양성혈청발생특이성반응.