靶向AKT1和COX-2的RNAi抑制U251胶质瘤细胞侵袭的体外实验
파향AKT1화COX-2적RNAi억제U251효질류세포침습적체외실험
Knockdown of AKT1 and COX-2 by small interference RNA suppresses the invasion of malignant glioma U251 cells in vitro
  • 万方数据
    中国神经精神疾病杂志 중국신경정신질병잡지
    CHINESE JOURNAL OF NERVOUS AND MENTAL DISEASES
    2010年 4期 241-245 ,共5页

    王轩%韩磊%杨晻%岳晓%张安玲%王广秀%贾志凡%浦佩玉%申长虹%康春生

    왕헌%한뢰%양엄%악효%장안령%왕엄수%가지범%포패옥%신장홍%강춘생

    RNA干扰%恶性胶质瘤%侵袭%基因治疗 RNA榦擾%噁性膠質瘤%侵襲%基因治療
    RNA간우%악성효질류%침습%기인치료
    目的 应用RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术敲低恶性胶质瘤细胞系U251中AKT1和COX-2表达后,在体外对细胞侵袭转移的抑制作用,初步探讨其可能的作用机制.方法 构建重组腺病毒载体rAd5-A-C同时搭载靶向AKT1和COX-2的shRNA干扰序列,将其转染至恶性胶质瘤细胞系U251细胞.Realtime PCR检测RNAi后目的基因mRNA的表达水平,Western Blot检测目的基因及MMP-2、 MMP-9、 TIMP-2的表达情况.酶联免疫吸附试验检测转染前后分泌到细胞外的MMP-2和MMP-9的浓度变化.划痕实验和Transwell实验评价肿瘤细胞转染前后的细胞侵袭能力的变化.结果 rAd5-A-C转染组AKT1和COX-2的mRNA和蛋白表达均明显抑制;MMP-2、MMP-9表达下调,TIMP-2表达则上调.ELISA检测胞外MMP-2、MMP-9浓度明显减低;划痕实验显示细胞转移运动能力明显减弱,Transwell体外侵袭实验结果显示穿过细胞数明显减低(P<0.001).结论 重组腺病毒介导的RNAi技术可以序列特异性地抑制U251细胞AKT1和COX-2的表达,在体外对U251细胞侵袭转移产生明显抑制作用,可能成为恶性胶质瘤治疗的新策略.
    목적 응용RNA간우(RNA interference,RNAi)기술고저악성효질류세포계U251중AKT1화COX-2표체후,재체외대세포침습전이적억제작용,초보탐토기가능적작용궤제.방법 구건중조선병독재체rAd5-A-C동시탑재파향AKT1화COX-2적shRNA간우서렬,장기전염지악성효질류세포계U251세포.Realtime PCR검측RNAi후목적기인mRNA적표체수평,Western Blot검측목적기인급MMP-2、 MMP-9、 TIMP-2적표체정황.매련면역흡부시험검측전염전후분비도세포외적MMP-2화MMP-9적농도변화.화흔실험화Transwell실험평개종류세포전염전후적세포침습능력적변화.결과 rAd5-A-C전염조AKT1화COX-2적mRNA화단백표체균명현억제;MMP-2、MMP-9표체하조,TIMP-2표체칙상조.ELISA검측포외MMP-2、MMP-9농도명현감저;화흔실험현시세포전이운동능력명현감약,Transwell체외침습실험결과현시천과세포수명현감저(P<0.001).결론 중조선병독개도적RNAi기술가이서렬특이성지억제U251세포AKT1화COX-2적표체,재체외대U251세포침습전이산생명현억제작용,가능성위악성효질류치료적신책략.
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