中国农业科技导报
中國農業科技導報
중국농업과기도보
REVIEW OF CHINA AGRICULTURAL SCIENCE AND TECHNOLOGY
2012年
2期
88-94
,共7页
胡小元%张岐蜀%段伟%姜国华%李玲
鬍小元%張岐蜀%段偉%薑國華%李玲
호소원%장기촉%단위%강국화%리령
Bt Cry1Ac%单克隆抗体%合成肽
Bt Cry1Ac%單剋隆抗體%閤成肽
Bt Cry1Ac%단극륭항체%합성태
为了制备Bt Cry1Ac特异性单克隆抗体(MAB),本试验从NCBI获得了Bt Cry1Ac蛋白的氨基酸序列,根据抗原性、亲水性和表位性分析选定Bt Cry1Ac特异性肽段进行人工合成,并将其偶联于匙孔血蓝蛋白(KLH)免疫动物,应用细胞融合技术制备了抗该肽段的杂交瘤细胞34株.通过ELISA和免疫印迹试验从中筛选出与Bt Cry1Ac天然蛋白产生特异性反应的单克隆抗体杂交瘤细胞株一株(6G9).ELISA和免疫印迹试验结果显示,该克隆株所分泌的MAB能对合成肽和Bt Cry1Ac产生特异性反应,而与同源的Bt Cry1Aa、Bt Cry1Ab天然蛋白均无交叉反应.通过对转基因棉花的ELISA检测结果表明,本试验所制备的Bt Cry1Ac单克隆抗体能够有效的区分常规棉和抗虫棉,并且能对其中的Bt Cry1Ac蛋白进行特异性的识别.
為瞭製備Bt Cry1Ac特異性單剋隆抗體(MAB),本試驗從NCBI穫得瞭Bt Cry1Ac蛋白的氨基痠序列,根據抗原性、親水性和錶位性分析選定Bt Cry1Ac特異性肽段進行人工閤成,併將其偶聯于匙孔血藍蛋白(KLH)免疫動物,應用細胞融閤技術製備瞭抗該肽段的雜交瘤細胞34株.通過ELISA和免疫印跡試驗從中篩選齣與Bt Cry1Ac天然蛋白產生特異性反應的單剋隆抗體雜交瘤細胞株一株(6G9).ELISA和免疫印跡試驗結果顯示,該剋隆株所分泌的MAB能對閤成肽和Bt Cry1Ac產生特異性反應,而與同源的Bt Cry1Aa、Bt Cry1Ab天然蛋白均無交扠反應.通過對轉基因棉花的ELISA檢測結果錶明,本試驗所製備的Bt Cry1Ac單剋隆抗體能夠有效的區分常規棉和抗蟲棉,併且能對其中的Bt Cry1Ac蛋白進行特異性的識彆.
위료제비Bt Cry1Ac특이성단극륭항체(MAB),본시험종NCBI획득료Bt Cry1Ac단백적안기산서렬,근거항원성、친수성화표위성분석선정Bt Cry1Ac특이성태단진행인공합성,병장기우련우시공혈람단백(KLH)면역동물,응용세포융합기술제비료항해태단적잡교류세포34주.통과ELISA화면역인적시험종중사선출여Bt Cry1Ac천연단백산생특이성반응적단극륭항체잡교류세포주일주(6G9).ELISA화면역인적시험결과현시,해극륭주소분비적MAB능대합성태화Bt Cry1Ac산생특이성반응,이여동원적Bt Cry1Aa、Bt Cry1Ab천연단백균무교차반응.통과대전기인면화적ELISA검측결과표명,본시험소제비적Bt Cry1Ac단극륭항체능구유효적구분상규면화항충면,병차능대기중적Bt Cry1Ac단백진행특이성적식별.
