CAJ | 학술논문

目的:探讨兔房水中是否能够分离得到具有脂质双分子层结构的纳米级小囊泡exosomes,并检测其是否表达免疫抑制相关分子,参与眼球免疫耐受状态的维持.方法:收集40只健康新西兰大白兔的房水,分级分离,超速离心制备exosomes,透视电镜对其形态进行鉴定；Western blot检测exosomes标志性蛋白以及免疫抑制相关分子TGF-β的表达情况；采用CCK-8细胞增殖检测方法判断兔房水来源的exosomes对经ConA诱导的兔子T淋巴细胞增殖情况的抑制功能.结果:40只新西兰大白兔收集到约8 ml的房水,从中获得200μg exosomes.经透射电镜鉴定:从房水中分离获得的exosomes直径主要集中在50～100 nm,具有典型的脂质双分子层结构；Wester blot结果表明,该exosomes表达热休克蛋白Hsp70、四次跨膜蛋白CD9以及内体相关蛋白Alix,不表达内质网蛋白Grp94,具有典型的exosomes蛋白表达谱.此外,该exosomes还表达免疫抑制相关分子TGF-β.体外抑制淋巴细胞增殖实验表明,房水来源的exosomes能够明显抑制T淋巴细胞的增殖.结论:兔房水中能够分离出具有免疫抑制功能的exosomes;该exosomes很有可能参与了眼球免疫耐受的维持.
목적:탐토토방수중시부능구분리득도구유지질쌍분자층결구적납미급소낭포exosomes,병검측기시부표체면역억제상관분자,삼여안구면역내수상태적유지.방법:수집40지건강신서란대백토적방수,분급분리,초속리심제비exosomes,투시전경대기형태진행감정；Western blot검측exosomes표지성단백이급면역억제상관분자TGF-β적표체정황；채용CCK-8세포증식검측방법판단토방수래원적exosomes대경ConA유도적토자T림파세포증식정황적억제공능.결과:40지신서란대백토수집도약8 ml적방수,종중획득200μg exosomes.경투사전경감정:종방수중분리획득적exosomes직경주요집중재50～100 nm,구유전형적지질쌍분자층결구；Wester blot결과표명,해exosomes표체열휴극단백Hsp70、사차과막단백CD9이급내체상관단백Alix,불표체내질망단백Grp94,구유전형적exosomes단백표체보.차외,해exosomes환표체면역억제상관분자TGF-β.체외억제림파세포증식실험표명,방수래원적exosomes능구명현억제T림파세포적증식.결론:토방수중능구분리출구유면역억제공능적exosomes;해exosomes흔유가능삼여료안구면역내수적유지.