南方医科大学学报
南方醫科大學學報
남방의과대학학보
JOURNAL OF SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY
2012年
5期
614-617
,共4页
刘悦%郝玉娥%詹轶群%许望翔%杨永升%葛常辉
劉悅%郝玉娥%詹軼群%許望翔%楊永升%葛常輝
류열%학옥아%첨질군%허망상%양영승%갈상휘
甘油激酶%慢病毒%肝细胞%重组质粒%RNA干扰
甘油激酶%慢病毒%肝細胞%重組質粒%RNA榦擾
감유격매%만병독%간세포%중조질립%RNA간우
目的 构建人甘油激酶( GK)基因 RNA干扰(RNAi)慢病毒载体,获得稳定下凋GK表达的慢病毒.方法 将具有干涉效果的siRNA序列克隆入慢病毒核心质粒pSicoR中,并转染293T细胞进行病毒包装,用慢病毒感染293T细胞并应用FACS测定病毒滴度.以GK 干涉慢病毒感染人肝细胞系L02细胞后,应用Western blotting方法检测GK的表达 结果 成功构建GK干涉慢病毒pSicoR-GK载体并获得慢病毒颗粒,病毒滴度检测可达3×10 pfu/ml,GK蛋白质表达水平下调至对照的约20％.结论 成功构建人GK基因RNAi慢病毒,为后续GK生物学功能研究奠定基础.
目的 構建人甘油激酶( GK)基因 RNA榦擾(RNAi)慢病毒載體,穫得穩定下凋GK錶達的慢病毒.方法 將具有榦涉效果的siRNA序列剋隆入慢病毒覈心質粒pSicoR中,併轉染293T細胞進行病毒包裝,用慢病毒感染293T細胞併應用FACS測定病毒滴度.以GK 榦涉慢病毒感染人肝細胞繫L02細胞後,應用Western blotting方法檢測GK的錶達 結果 成功構建GK榦涉慢病毒pSicoR-GK載體併穫得慢病毒顆粒,病毒滴度檢測可達3×10 pfu/ml,GK蛋白質錶達水平下調至對照的約20％.結論 成功構建人GK基因RNAi慢病毒,為後續GK生物學功能研究奠定基礎.
목적 구건인감유격매( GK)기인 RNA간우(RNAi)만병독재체,획득은정하조GK표체적만병독.방법 장구유간섭효과적siRNA서렬극륭입만병독핵심질립pSicoR중,병전염293T세포진행병독포장,용만병독감염293T세포병응용FACS측정병독적도.이GK 간섭만병독감염인간세포계L02세포후,응용Western blotting방법검측GK적표체 결과 성공구건GK간섭만병독pSicoR-GK재체병획득만병독과립,병독적도검측가체3×10 pfu/ml,GK단백질표체수평하조지대조적약20％.결론 성공구건인GK기인RNAi만병독,위후속GK생물학공능연구전정기출.
